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北京缔一生物科技有限公司 主营产品:细胞培养,进口胎牛血清,支原体检测试剂盒,干细胞培养基,支原体祛除试剂

第10年

当前位置: 阿仪网 > 北京缔一生物科技有限公司 > 产品展示 > 支原体检测盒及标准品 > 荧光定量PCR检测 > MycoQSearch™ 支原体qPCR检测试剂盒(EP)

MycoQSearch™ 支原体qPCR检测试剂盒(EP)

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号:原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/6 11:07:01

产品摘要:MycoQSearch™支原体qPCR检测试剂盒采用探针法实时荧光PCR(qPCR),用于检测细胞培养物中的支原体污染。试剂盒包含引物探针混合液;FAM标记探针特异性识别支原体物种,HEX标记探针用于检测内对照DNA。

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旗舰版网址:http://www.dybiological.com

详细内容

中文名称:MycoQSearch™ 支原体qPCR检测试剂盒(EP)

英文名称:MycoQsearch™ Mycoplasma qPCR Detection kit (EP)


品牌:Cellsafe

货号:QDEP-100

规格:100次/盒


用途:本试剂盒采用高灵敏度qPCR 技术,用于生物制品的项目申报、方法学验证、放行检测中支原体qPCR检测。本品可作为传统培养法的替代方案,符合欧洲药典EP、日本药典JP 、美国FDA、韩国食品药品安全部MFDS的要求。


货号

品名(EP欧洲药典)

规格

价格

QDEP-100

MycoQSearch™ 支原体qPCR检测试剂盒(EP)

MycoQsearch™ Mycoplasma qPCR Detection kit (EP)

100次/盒

询价


一、产品原理:

MycoQSearch™支原体qPCR检测试剂盒采用探针法实时荧光PCR(qPCR),用于检测细胞培养物中的支原体污染。试剂盒包含引物探针混合液;FAM标记探针特异性识别支原体物种,HEX标记探针用于检测内对照DNA。

引物针对支原体基因组高度保守的16S rRNA编码区设计,可检出107种污染支原体,包括细胞培养常见的:口腔支原体、猪鼻支原体、精氨酸支原体、发酵支原体、莱氏无胆甾原体、人型支原体、肺炎支原体、唾液支原体、柠檬螺原体、滑液支原体以及脲原体。本试剂盒不会扩增真核生物DNA以及其他细菌DNA。


二、产品特点:

1、符合欧洲药典EP、日本药典JP 、美国FDA、韩国食品药品安全部MFDS要求,用于生物制品的项目申报、方法验证、放行检测中支原体的qPCR检测;

2、本试剂盒采用FAM和HEX双通道检测体系,适配常见的荧光定量PCR仪;

3、高灵敏度:每个反应可以检测到1~10拷贝靶DNA,完全满足<10cfu/ml、<100GC/ml要求;;

4、特异性:通过特异性引物设计,有效避免与支原体亲缘关系较近的其他菌种发生交叉反应,从而降低假阳性风险。

5、本试剂盒配备了UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)防污染体系。根据检测需要,可在qPCR反应前加入UDG酶,有效清除既往PCR反应中残留的含尿嘧啶扩增产物,降低扩增产物污染引起的假阳性风险。

6、检测时长:视qPCR仪器,总检测可控制在3小时以内。


三、试剂盒主要组分:

序号

管盖颜色

组分

用途

组分体积

1

蓝色

qPCR预混液

qPCR Master Mix

qPCR扩增预混液,含dUTP

1.5 mL

2

琥珀色

引物和探针

Primer and Probe Mix

FAM/HEX引物探针混合液

200 µL

3

紫色

管样品准备用内控对照
Internal Amplification Control DNA for sample prep

提取前加入,提取内对照IC(实验主要质控)

2 mL

4

橙色

PCR反应用内控对照

Internal Amplification Control DNA

内对照DNA原液

200 µL

5

黄色

阳性对照

Positive Control DNA

支原体阳性对照模板

50 µL

6

琥珀色

50倍浓缩低ROX参比染料

(Low-ROX)

50倍浓缩高ROX参比染料

(High-ROX)

ABI仪器荧光归一化校正;其他平台不加ROX

60 µL

7

白色

无DNA酶的水

DNaseFree Water

无酶水

1.2 mL


四、标准实验流程要点(EP2.6.7)

1、取1 mL细胞培养液,15000 rpm离心10 min,沉淀支原体,弃上清;

2、核酸提取(以Qiagen QIAamp UCP Pathogen Mini Kit为例): 加入蛋白酶K的同时,加入20 µL紫色管IC内对照DNA,56℃裂解;后续按试剂盒完成提取,洗脱体积50µL;

3、qPCR总体系30µL;模板上样量5µL;

4、qPCR程序:

a.(选配UDG:增加37℃孵育步骤)

b.预变性:95 ℃,5 min

c.45循环:95 ℃,20 sec;60 ℃ 30 sec;72 ℃ 30 sec

5、荧光采集:FAM(支原体)、HEX/VIC(内对照IC)


五、结果判读

FAM(支原体)

HEX/VIC(提取内对照IC)

判读结论

Ct<40 阳性

阳性

支原体阳性

Ct<40 阳性

阴性

支原体阳性

阴性

阳性

样品无支原体污染,实验有效

阴性

阴性

PCR抑制或样品前处理失败,结果无效,需复测


六、ROX染料选型简表

1、High-ROX高ROX:ABI老机型:7000/7300/7900HT/StepOne系列

2、Low-ROX低ROX:ABI 7500、QuantStudio系列;Stratagene MX系列

3、No-ROX不加染料:Bio-Rad、Roche、Qiagen Rotor-Gene、Eppendorf等非ABI平台


七、关键注意点

1、反复冻融损伤试剂,频繁使用建议分装,-20℃保存;

2、推荐使用带滤芯枪头,设置独立核酸配制区,降低气溶胶污染;

3、本试剂盒内对照为提取阶段加入的IC(提取内对照),同时有IAC扩增内参,可以同时监控提取损失与PCR抑制,

4、UDG酶为外购试剂,试剂盒不包含,不用UDG则无dUTP-UNG防污染能力。


八、储运与有效期

运输与储存:-20℃

有效期:详见外包装失效日期


热门标签:支原体qPCR检测试剂盒,MycoQSearch支原体检测,支原体qPCR试剂盒

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