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技术文章
细胞培养中重要的步骤——无菌操作
点击次数:3882 发布时间:2021/12/30 14:32:29
细胞实验室常面对的难题就是:如何保持无菌。细胞一旦遭到污染,所有的实验结果都会变得毫无意义。
结细胞污染的主要原因包括:操作技术不严格、试剂质量不达标、大气中孢子计数增加、养箱或操作台使用和维护不当等。
因此,在细胞培养过程中,操作者不仅要严格遵守标准的操作程序,同时还要特别注意新产品、新品牌、以及设备的清洁维护。同时,及时检测并鉴定细胞是否被污染同样至关重要。
实验进行,超净台以紫外灯照射 30 分钟灭菌,以 70 % ethanol 擦拭无菌操作台面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,避免细胞间交叉污染。
实验完毕后,将实验物品带出工作台,再次以 70 % ethanol 擦拭无菌操作台面。实验用品以 70% 乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般不要再边缘区域操作。
试验台、超净台、培养箱、液氮罐、移液器、门把手、电话等细胞培养环境被支原体污染,可引起细胞的污染。应定期对工作区域进行消毒。本文缔一生物为您分析实验室工作区域中支原体祛除的方法。
常用以下三种方法:
Mycoplasma OffTM是一款支原体喷雾剂,用于清除工作区域中的支原体。它起效快(10钟即起效),安全无毒,对细胞不会产生不良影响,喷洒后,可再用干净纸张擦拭即可。对于工作台以及各种细胞操作的器具表面,均可使用。如果是需要避免沾染液体的电子设备,可使用Mycoplasma OffTM湿巾擦拭。
细胞孵箱、水浴锅等有温水的地方,也容易滋生支原体、细菌等。在循环水中倒入Water ShieldTM(1:200稀释)即可有效地预防滋生,效果可持续1个月左右。
Mycoplasma OffTM对许多细菌、病毒也有预防和杀灭作用。
原创作者:北京缔一生物科技有限公司






