当前位置：阿仪网>北京缔一生物科技有限公司>技术文章>支原体污染的检测方法！
企业档案
会员类型：旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
90成长值
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
阿仪网旗舰版会员：10年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号： 【已认证】
法人代表： 【已认证】
参观次数：1336006
技术文章
支原体污染的检测方法！
点击次数：2822 发布时间：2024/12/27 8:59:17
将细胞种植在培养瓶内的盖玻片上，24小时后取出，使用相差油镜观察。支原体表现为暗色微小颗粒，位于细胞表面和细胞之间。
使用能与DNA特异性结合的荧光染料Hoechst 33258进行染色，使支原体内的DNA着色，然后用荧光显微镜观察。
具体步骤包括：将细胞接种在盖玻片上，未长满前取出玻片，用不含酚红的Hanks液漂洗，用1:3醋酸甲酯固定10分钟，再用生理盐水漂洗，置于浓度为50μg/ml的Hoechst 33258中染色10分钟，最 后用蒸馏水洗1-2分钟，滴加pH5.5磷酸缓冲液，观察亮绿色小点。
利用扫描电镜或透射电镜进行检测，方法简便快速。
检出率高，但方法较为复杂。
控制环境污染
严格实验操作
保证细胞培养和器材无菌
在细胞培养中加入适量的抗生素
灵敏度高、特异性强。
检测时间短，2-3小时出结果。
检测结果可定量。
操作简便。
对于已做支原体灭活处理的样品，可能出现假阳性。
不同厂家生产的试剂盒质量差异大，需谨慎选择。
原创作者：北京缔一生物科技有限公司
