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技术文章
盘点细胞培养中,内毒素的影响有哪些?
点击次数:2762 发布时间:2024/11/28 9:12:47
内毒素是革兰氏阴性细菌的细胞壁成分,通常在用于细胞培养的胎牛血清(FBS)中发现。FBS中内毒素的存在会对细胞生长和活力产生负面影响,并可能导致不准确的实验结果。
内毒素可以激活免疫细胞,诱导促炎细胞因子的释放,从而导致细胞死亡,抑制细胞增殖。它们还可以干扰细胞过程,如DNA合成和蛋白质表达,从而影响实验结果。
有下列情况者,对血清内毒素应格外留意筛选:
1.养干细胞时,干细胞对内毒素非常敏感,如果血清中内毒素≥3EU/ml时,干细胞很容易死亡。很多使用者,在血清在试用前,就通过提早审核该批次《检测报告》,以决定是否入围进行试用。
2.养免疫细胞时,过高的内毒素可诱导免疫细胞释放炎症因子,抑制小鼠红细胞集落的形成等。
3.基因敲除相关的细胞实验,培养的细胞要尽可能保持其原始状态,任何引导细胞衰老或凋亡的试剂,都会让后续的实验结果“失之毫厘,谬以千里”。在准备血清和其他试剂时,选择极低的内毒素(jinliang ≤1EU/ml),对实验至关重要;
4.原代培养、杂交瘤融合、细胞转染,或者肝细胞、神经细胞、内皮等难养细胞的扩增,这些都需要挑选好的血清给细胞以有力支持。因此,挑选更低的内毒素,是保证实验顺利的**步。
5.实验室有些细胞,需要长 期培养、长 期冻存,或者经常复苏、经常培养的,血清会经常或长时间作用于细胞。为保证细胞的健康,都应该选用更低内毒素的血清,以避免内毒素长 久对细胞的毒性影响。
为了尽量减少内毒素对细胞培养的影响,建议使用经过测试和认证的内毒素水平较低的FBS。重要的是要注意,从胎牛血清中去除所有内毒素并不太现实,但过高的内毒素残留水平,仍可能对细胞培养产生影响。因此,仔细监测胎牛血清对细胞生长和活力的影响,并选择一款内毒素含量低的血清是很重要的。
缔一生物的Ausbian进口胎牛血清,内毒素含量低,≤3EU/ml,为细胞实验保驾护航。

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