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技术文章
如何从细胞核中移除不必要的细胞组分
点击次数：3853 发布时间：2020/12/22 9:47:15
项刊登在际杂志Nature上的研究报告中，来自欧洲分子生物学实验室等机构的科学家们通过研究揭示了如何从细胞核中移除不想要的组分。将细胞组装成为特殊的区室/隔间对于细胞的功能而言至关重要，比如，通过将细胞核与细胞质分离，核被膜就能防止对不成熟的RNAs进行过早地翻译。
然而，在有丝分裂期间，核被膜会发生分解从而允许诸如核糖体等大型细胞质组分与核物质混合，当核被膜在有丝分裂后重新组装时，这些细胞质组分会被再次移除，而核被膜会通过主动输入或输出定尺寸大小的底物来促进这过程的发生，但目研究人员并不清楚这对于大型的细胞质组分会发生什么。
如研究人员发现，实际上，诸如核糖体等大型的细胞质组分在核被膜再次组装之就会被从形成的细胞核中移除，而这种排出过程需要名为Ki-67的蛋白质的帮助；在此研究中，研究者发现，蛋白质Ki-67在有丝分裂早期戒断扮演着表面活性剂的角色，其主要负责保持染色体的分离状态，值得注意的是，如研究者发现，这会改变其在有丝分裂结束时的特性，并且会发挥相反的功能，即染色体的聚集，通过在细胞分裂结束时聚集形成个密集的簇状结构，染色体就能在核被膜重组将大型的细胞质组分排出。
后研究者表示，本文研究揭示了种单蛋白如何明显改变染色体的表面特性的，后这或许会促进细胞内关键过程的有效划分。
项刊登在际杂志Nature上的研究报告中，来自欧洲分子生物学实验室等机构的科学家们通过研究揭示了如何从细胞核中移除不想要的组分。将细胞组装成为特殊的区室/隔间对于细胞的功能而言至关重要，比如，通过将细胞核与细胞质分离，核被膜就能防止对不成熟的RNAs进行过早地翻译。
然而，在有丝分裂期间，核被膜会发生分解从而允许诸如核糖体等大型细胞质组分与核物质混合，当核被膜在有丝分裂后重新组装时，这些细胞质组分会被再次移除，而核被膜会通过主动输入或输出定尺寸大小的底物来促进这过程的发生，但目研究人员并不清楚这对于大型的细胞质组分会发生什么。
如研究人员发现，实际上，诸如核糖体等大型的细胞质组分在核被膜再次组装之就会被从形成的细胞核中移除，而这种排出过程需要名为Ki-67的蛋白质的帮助；在此研究中，研究者发现，蛋白质Ki-67在有丝分裂早期戒断扮演着表面活性剂的角色，其主要负责保持染色体的分离状态，值得注意的是，如研究者发现，这会改变其在有丝分裂结束时的特性，并且会发挥相反的功能，即染色体的聚集，通过在细胞分裂结束时聚集形成个密集的簇状结构，染色体就能在核被膜重组将大型的细胞质组分排出。
后研究者表示，本文研究揭示了种单蛋白如何明显改变染色体的表面特性的，后这或许会促进细胞内关键过程的有效划分。
在培养细胞时，人们常常关注细菌和菌的污染，认为它们是细胞培养的主要干扰因素。但其实，更严重的是支原体 的感染，它的发生率非常高，而且不易被发现。不仅普通光镜下无法发现支原体，而且培养基也不容易变色。只有在污染的后期培养基才容易变黄。下图为支原体严重污染后的表现：
那么，支原体污染为什么发生率这么高？
细胞培养中有几种支原体污染与人、牛和猪有关。实验室的工作人员是口腔支原体、发酵支原体和人型支原体的主要来源。这三种支原体占细胞培养中支原体污染的半以上，它们主要存在于人的口咽部。支原体也存在于人的头发、皮肤上。胰酶如果是猪来源的，那么也可能存在猪鼻支原体。以下为支原体污染的主要途径。
因此，对于实验室所培养的细胞，应进行支原体的定期监测。德MB公司『支原体常规PCR检测试剂盒』(如Venor® Gem OneStep试剂盒)是常用的支原体筛查用试剂盒，可用于细胞培养中是否存在支原体污染的筛查。
它具有以下的特点：
①高特异性，270bp左右的条阳性对照条带，涵盖了所有可能感染细胞的支原体物种，操作简单，结果易于观察。（根据16s rRNA序列的同源性比对，该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体。）
②高灵敏度。
③试剂盒含内控对照，可防止假阴性的发生。
(2)操作步骤
下列图示以Venor® Gem OneStep支原体常规PCR检测试剂盒(步法)( 货号：11-8050) 为例，具体产品操作以说明书为准。
第1步：样本处理
第2步：试剂制备
第3步：PCR体系建立
第4步：启动PCR反应
第5步：电泳结果分析
原创作者：北京缔一生物科技有限公司
