企业档案
会员类型：旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
阿仪网旗舰版会员：10年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号： 【已认证】
法人代表： 【已认证】
参观次数：1336302
技术文章
PCR Clean科研实验数据
点击次数：4076 发布时间：2020/10/16 12:57:00
PCR Clean™是一款即用型工作液，用于去除PCR工作台、实验室机电产品和设备表面上留存的核酸。该工作液包含一种表面活性剂和一种非碱性非致癌性试剂。在这项研究中，我们针对不同的表面上留存的不同类型的核酸，检查了PCR Clean™的使用效果和效率，并和其他的几种去除剂进行了比较。
实验过程
1、去除不同表面上的DNA扩增片段
我们用大肠杆菌O104和O157的DNA扩增片段，检查了PCR Clean™对DNA污染的去除效率，并和其他几种去除试剂进行了比较。我们在塑料薄膜、玻璃表面和千思板（常用于实验工作区台面，Trespa®品牌）滴加了2μl（0.2 ng）大肠杆菌O104 DNA，在Plexiglas®（树脂玻璃）和铝表面滴加了2μl（0.2ng）大肠杆菌O157 DNA。待DNA完全风干后，用蘸有PCR Clean™或一种稀释的洗洁精、70%乙醇、异丙醇、水的纸巾擦拭去除，或者用干纸巾擦拭去除。随后用一个干净潮湿的拭子在该区域表面涂拭取样。另取0.05 ng大肠杆菌O104 DNA或0.2 ng大肠杆菌O104 DNA作为阳性对照，加入250l PCR级别水溶解，其抽提方式和其他样品一样。
2、去除铝表面的基因组DNA和质粒DNA
在铝表面滴加2μl（2X106拷贝数）大肠杆菌基因组DNA或质粒DNA测试。PCR Clean™与蘸水的湿纸巾或干纸巾对照。
3、去除Plexiglas®（树脂玻璃）表面上的RNA
在Plexiglas®表面6个点分别滴加5g（11μl）RNA进行测试。取样后的RNA作逆转录和qPCR。
4、DNA抽提和qPCR扩增
拭子上的DNA采用SwabUp™ Lab Monitoring试剂盒进行抽提。所有收集的样本DNA和阳性对照抽提的方式相同。随后进行qPCR。
检验结果
1、去除不同表面的DNA扩增片段
结果显示，和其他几种清除剂相比，PCR Clean™的对扩增的DNA段去除的更多（见表1），效果最jia（见图1），Ct值更高。
表1：与其他清除剂相比，使用PCR Clean™后，qPCR测定的细菌DNA扩增片段的Ct值
图1：采用不同的清除剂，对 A.树脂玻璃®、B.铝、C.千思板®、D.玻璃和E.塑料薄膜上的大肠杆菌DNA扩增片段去除后，qPCR的扩增曲线
2、去除铝表面的基因组DNA和质粒DNA
结果显示，与水和干纸巾相比，含PCR Clean™的湿巾对基因组DNA和质粒DNA有更多的去除（见表2）。Ct值（图2,A，B）更高，提示DNA量有大幅下降。
表2：与水和干纸巾相比，使用PCR Clean™后，qPCR测定的铝表面基因组DNA或质粒DNA的Ct值
图2：采用PCR Clean™、水或干纸巾去除铝表面的大肠杆菌基因组DNA或大肠杆菌质粒DNA后的qPCR扩增曲线
3、去除Plexiglas®（树脂玻璃）表面的RNA
和其他几种清除剂相比，PCR Clean™对Plexiglas®表面的RNA去除最多（见表3），Ct值也最gao（见图3）
表3：和其他几种清除剂相比，PCR Clean™去除树脂玻璃表面的RNA后，RNA逆转录合成cDNA, 再qPCR测定Ct值
图3：使用不同的清除剂，从树脂玻璃®中去除RNA后，RNA再逆转录并进行qPCR扩增
结论
我们研究的结果显示，PCR Clean™对来自所有检测表面的DNA扩增片段，质粒、基因组DNA和RNA污染的去除，是极为有效的，而且起效很快。去除结果还显示，相比于其他常见的DNA清除剂，比如分子生物学实验室常用的乙醇、异丙醇或洗洁精，PCR Clean™的去除效果和效率都具有明显的优势。因此，在PCR反应前后，经常使用PCR Clean™，会非常便捷，可理想地保持干净的工作区域，而这对于分子生物学实验室和PCR工作台都是非常重要的，因为它可节省时间和支出。
原创作者：北京缔一生物科技有限公司
