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技术文章

内毒素细胞凋零的元凶

点击次数:4102 发布时间:2020/8/27 15:19:08

评判什么是优质的血清,首先我们需要了解什么是内毒素?内毒素(Endotoxin)是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有成分。细菌在生存状态时释放不出来,只有当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时,才表现其毒性。内毒素的主要化学成分是脂多糖中的类脂A成分。内毒素直接参与细胞凋亡,血清中内毒素含量越低,对细胞毒性越小,越利于细胞的生长和传代;内毒素含量过高,会直接导致细胞提前老化。因此,血清应进行内毒素水平检测。国际上规定,胎牛血清的级别应以内毒素水平的高低来确定,其中,特级胎牛血清的内毒素应<10EU/ml。

有没有发现细胞有时候养着养着就凋零死亡了,细胞死亡原因可能有时候有多种因素,其中因选择内毒素高的血清培养血清不在少数,所以养过细胞的小伙伴共识越是培养珍贵细胞越应该选择内毒素底的血清。

例如:干细胞体外培养实验,由于干细胞的原始性,它们对内毒素非常敏感,所以,当血清内毒素偏高时,细胞很容易死亡,需要在试用前提早参看该批次《检测报告》,以决定是否入围进行试用。

又例如:基因敲除相关的细胞实验,培养的细胞要尽可能保持其原始状态,任何引导细胞衰老或凋亡的试剂,都会让后续的实验结果“失之毫厘,谬以千里”。所以,选择极低内毒素的血清,至关重要。

同样,例如:原代培养,杂交瘤融合,细胞转染,难养细胞在体外的增殖(肝细胞,神经细胞,内皮细胞等)....这些细胞的培养都需要内毒素更低的血清,如果内毒素过高,对细胞造成的损害,会大大影响后续实验结果。

还有一些细胞,实验室比较常用,经常复苏,培养,冻存,如此,血清会经常作用于细胞;还有的细胞需要培养的时间较长,血清会长时间作用于细胞;还有细胞典藏等项目,都需要使用更低内毒素的血清,以避免内毒素长久对细胞的毒性影响。




原创作者:北京缔一生物科技有限公司

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