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技术文章
优质的新生牛血清可以培养干细胞
点击次数：4111 发布时间：2020/7/24 13:03:55
新生牛血清被广泛应用于疫苗产品等大量生产生物制品领域，而培养干细胞大部分实验室仍采用品质更高的胎牛血清，其实在培养肠道干细胞已经有实验室采用新生牛血清尝试培养，下面我们来看看相关实验结果。
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肠道干细胞位于肠隐窝内，在维持肠道屏障结构和功能完整方面扮演着重要角色。用体外培养技术对肠干细胞进行原代培养，以进一步了解其增殖分化机制，这对治疗肠道相关疾病具有重要意义。而血清品质和浓度对原代细胞贴壁和生长则具有相当大的影响。有人曾尝试采用DMEM加新生牛血清或胎牛血清进行肠道干细胞的原代培养。尝试的血清浓度分别为 5%、10%、15%及 20%，并且还加入表皮生长因子20ng/ml、胰岛素2 g/ml、谷氨酰胺 2 mmol/ml、青霉素及链霉素各 100 U/ml。肠干细胞的鉴定则采用用角蛋白18抗体（肠干细胞为阳性）以及波形蛋白抗体（肠干细胞为阴性，间质细胞为阳性）进行组化染色和鉴定。
作者对胚胎鼠肠组织进行的肠干细胞的分离和培养。结果显示，只有采用10%新生牛血清加DMEM的培养方式效果最好，在培养24～48h后，贴壁生长的细胞绝大部分为上皮细胞，上皮样细胞呈集落状生长，这与国外报道的细胞形
态基本符合，其杂质细胞却很少见到。而其他血清加DMEM的培养则镜下显示，细胞含有大量呈梭状的间质细胞，上皮细胞所占比例不足 5%。由上可见，采
用含10%新生牛血清的细胞培养基进行肠干细胞群的构建可以获得较为纯化的肠干细胞群，角蛋白18染色阳性，波形蛋白染色阴性。因此，选择合适的血清质量和浓度对干细胞的培养有着十分重要的意义。
原创作者：北京缔一生物科技有限公司
