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技术文章
微生物法测定泛酸的方法学考察
点击次数：4501 发布时间：2018/5/18 15:38:52
泛酸是辅酶A（CoA）和酰基载体蛋白（ACP）生物合成的重要前体物质，参与人体中类固醇、褪黑激素、抗体和亚铁血红素的合成，是维持生命正常生理机能的必需小分子有机物，也是婴幼儿乳粉中重要的营养物质。
目前的两种方法——微生物法和高效液相色谱法都可以用于检测奶粉等婴幼儿食品中的泛酸，结果具有可比性。微生物法法测定泛酸含量灵敏度高，其标准曲线相关系数、回收率和相对标准偏差方面，检测结果都较好。而高效液相色谱法的检测速度较慢、成本较高，所以采用微生物法进行大量样本的测定，被美国AOAC所推荐，也是我国国家标准检验方法的仲裁法。
但该方法操作步骤较多，微生物生长的不确定性强也会影响结果。注意这些可能存在的影响因素，可以保证测量结果的稳定和准确。有人研究发现，对泛酸检验结果影响最大的是试样前处理（存在泛酸损失）及稀释（包括容量瓶、吸量管、量筒等玻璃器具的校准和室温对液体体积的影响），其次是标准溶液的配制。另一项研究则发现，是微生物因素引起的吸光度曲线偏离线性影响最大，因此建议在日常监测中，减少微生物培养环境因素的波动，对培养环境实时更严格的控制。
关于微生物法测泛酸的精密度，有人对14个婴儿配方奶粉的泛酸含量进行了测定，进行了28次相对误差和20次回收率的观察，发现75%的结果相对误差都<10%，回收率有80%在90~110%之间，说明该方法用于检测奶基婴幼儿食品是可行的。
又有研究发现，标准曲线在0~50ng/ml范围内，线性关系较好。同时提出几点注意事项，要注意无菌操作；避免菌种污染；玻璃器皿要严格清洗；必要的话，样本多做几个稀释度的实验；降温过程中，要将试管浸入冷水中，使其迅速降温，避免沉淀和颜色产生；用软件拟合4次泛酸标准曲线。
原创作者：北京缔一生物科技有限公司
