企业档案
会员类型：旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
阿仪网旗舰版会员：10年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号： 【已认证】
法人代表： 【已认证】
参观次数：1336006
技术文章
如何准备用于生长促进曲线测定的细胞
点击次数：4465 发布时间：2017/8/16 10:52:10
要进行细胞生长曲线的测定，来反映FBS的功能，需要先准备足够的有活力的细胞。威正翔禹/缔一生物根据美国药典（USP）的描述分析如何准备用于生长促进曲线测定的细胞。
用37℃水浴快速解冻一管FBS。计数细胞并观察活力。用添加FBS的完全培养基在37℃培养细胞，具体遵循ATCC对相应细胞提供的指导。镜下观察，保证细胞均一分布，贴壁或悬浮接近长满。细胞再传代，直至培养的细胞数足够用于检测（总细胞数需要1X107个，活力大于90%）。
收获细胞时，先弃掉上清，用不含FBS的培养基冲洗；对贴壁细胞，加1 mL of Trypsin/EDTA消化，必要时用1ml不低于10%FBS的培养基中和。离心，弃上清，细胞重悬。此时，细胞即可用于接种。
接种细胞时，应测试最佳的接种密度，起始密度范围为2×103~2×104活细胞/mL。选取至少5个时间点，3个复孔，以确定细胞最佳接种密度。在37℃，5%CO2的培养箱孵育。对7天内的每个时间点的培养细胞进行拍照（第0,1,2,3,4,7天）。应采用待测试的血清和USP的参考血清，测试三种血清浓度。记录下每种条件下细胞的汇合度。在预定的时间点上收获细胞。对细胞总数和活力进行计数。
综上所述，您是不是已经对如何准备用于生长促进曲线测定的细胞，有所了解。如果还有其他疑问，请咨询威正翔禹/缔一生物资深专家。
原创作者：北京缔一生物科技有限公司
