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技术文章
Biocoll细胞分离液的使用方法
点击次数：4649 发布时间：2017/6/20 14:21:54
Biocoll细胞分离液含有一种高分子聚合物，分子量约为400000道尔顿。本文威正翔禹/缔一生物为您分析Biocoll细胞分离液的使用方法。
Biocoll细胞分离液采用亲水多聚体，最高密度为1.1g/mL，如要寻求最佳pH和渗透压，可用酸碱（如泛影酸和NaOH）调整。Biocoll分离液中的两种，密度分别为1.077g/ml (货号L6113，100ml；L6115，500ml)和1.090g/ml (货号L6125)，均已调好。另一种密度为1.10g/ml(L6155，500ml)。
使用Biocoll分离淋巴细胞：
1） 分别将7mL和10mL Biocoll细胞分离液（D=1.077g/mL, 20℃）放入15mL和25mL的离心管中。
2） 将肝素化抗凝全血（50U/mL肝素,无稳定剂）与等体积培养基混合均匀，小心添加在Biocoll细胞分离液的液面上。
3） 1200g离心20min。
4） 用巴斯德吸管吸取（70-100%）淋巴细胞富集层（位于血浆和Biocoll之间），加入培养基中洗2次，
*300g离心10min。
*200g离心10min
即得所需淋巴细胞，可以按常规方法进行细胞计数等实验。
建议使用范围：
科研使用
储存：
2-8℃ 避光
补充说明：
这两种分离液均为即用型，已调好生理渗透压和pH值。
附1：血细胞在连续密度梯度中的分布
附2：用PBS稀释Biocoll储存液的推荐量（温度：20℃）
PBS应不含Ca2+、Mg2+，因为这些离子会导致细胞聚集和成团。
原创作者：北京缔一生物科技有限公司
