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技术文章

细胞P38激酶总活性光度法定量检测试剂盒的实验步骤

点击次数:3619 发布时间:2021/6/24 17:55:23

细胞P38激酶总活性光度法定量检测试剂盒的实验步骤

一、 待测样品准备

1. 准备好75cm2细胞培养瓶或100mm细胞培养皿的待测培养细胞(1至5 X 107细胞)

2. 小心加入xx毫升清理液(Reagent A),覆盖生长表面

3. 小心抽去清理液

4. 使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞(注意:避免使用胰酶消化)

5. 加入xx毫升清理液(Reagent A),混匀细胞

6. 移入到预冷的15毫升锥形离心管(注意:悬浮细胞从这一步骤开始)

7. 放进4℃台式离心机离心5分钟,速度为300g

8. 小心抽去上清液

9. 加入xx至xx微升裂解液(Reagent B),充分混匀(注意:可以调节蛋白浓度)

10. 转移到预冷的1.5毫升离心管

11. 强力涡旋震荡15秒

12. 置于冰槽里孵育30分钟

13. 放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf 5415)

14. 小心移取100至500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管

15. 移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-GMS30030.1)

16. 即刻放进-70℃保存或置于冰槽里继续后续操作



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上海极威生物科技有限公司(Shanghai JIwei Biological Technology Co., Ltd.)成立于上海,是一家专业从事“产品研发、市场销售、技术服务”为一体的高科技生物技术公司。主营产品: elisa试剂盒,动物血制品,细胞株,标准品,生化试剂盒,经销品牌:Abcam、Sigma、CST、Amresco、BD、Enzo、Bio-Rad、merck、Santa Cruz、Jackson、R&D、Merck Millipore、gibco、hyclone、Bio-World、NEB、Tocris、Corning、Axygen(未提及的品牌,我公司可以代购)

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ELISA、生化测试、液相气相检测、Icp-MS测试、载体构建、RACE、全基因合成、线粒体测序、荧光定量PCR、基因克隆、定点突变、染色体步移、基因组全序列获取、环境微生物多样性、微生物基因组测序、微生物菌种鉴定、甲基化分析服务
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