血清，指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞的起到某些保护作用。
①抗原量：ELISA实验中所需的抗原量一般为1-10mg/mL。
②免疫途径：抗原的注射方法有皮下注射、肌肉注射、腹膜内注射、静脉注射和淋巴结注射等。其中以静脉注射最为简单方便，不需要佐剂乳化，产生抗体的高峰值出现较早，一般在一周左右，注射后一周即可采血测试效价。
注：免疫过程中应注意：a.佐剂只能现配现用：b.采血时间不宜拖得太长。因为免疫时间越长，产生交叉反应的抗体也越多。
③血清的分离：elisa试剂盒抗血清的分离，当得到满意的效价时，即可进行取血。将收集到的血液成斜面放置在37℃、温箱中2h。然后置于4℃冰箱过一夜。次日用滴管吸取抗血清，用离心法（2000-3000r/min,20min）去掉沉淀。然后测定效价、鉴定纯度。
注：纯度用紫外分光光度计或Folin氏比色法进行测定。抗血清保存于-25℃低温处。
④效价测定：抗血清的效价测定，测定的方法一般有两种，即试管沉淀法和免疫双扩散法。对于免疫酶技术使用的抗血清，必须具有一定的效价，试管沉淀法应不低于1:2，免疫双扩散法不低于1:2，且要求单价抗血清。
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