关于CTRP1蛋白分子的结构:CTRP是与肿瘤坏死因子α(TNF-α)具有相似空间结构的蛋白,均含C 末端球形结构域和N 末端信号肽。CTRP1 是CTRP 超家族成员之一,Wong 等发现它与脂联素也有高度相似的空间结构,都包括1 个N 末端信号肽、1个短的可变结构域、1个包含不同长度Gly-X-Y (X 、Y 可代表任意氨基酸)重复序列的胶原结构域和1个与补体蛋白C1q 同源的C 末端的球形结构域。尽管与脂联素的空间结构相似,但两者没有高度同源的核酸及氨基酸序列,仅有4 个同源高度保守的氨基酸残基(Tyr-161 、Gly-159 、Phe-237 和Leu-242)形成疏水核。
小知识:ELISA实验中的定量测定
ELSIA操作步骤复杂,影响反应因素较多,特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致,因此在定量测定中,每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。测定大分子量物质的夹心法ELISA,标准曲线的范围一般较宽,曲线zui高点的吸光度可接近2.0,绘制时常用半对数纸,以检测物的浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,将各浓度的值逐点连接,所得曲线一般呈S形,其头、尾部曲线趋于平坦,中央较呈直线的部分是最理想的检测区域。
测定小分子量物质常用竞争法,其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因试剂盒所用模式的差别而略有不同。
人类CTRP1(hCTRP1)与鼠类CTRP1(mCTRPl)结构在进化过程中高度保守,蛋白全长具有77% 的同源性,其中C 末端球形结构域具有86% 的同源性,N 末端可变结构域具有65% 的同源性。hCTRP1 位于染色体17 q25.3 ,CTRPl cDNA 全长2744 bp ,含有4个外显子,编码199个氨基酸,产生相对分子质量为22 600 的蛋白,属于作用于V2 血管加压素受体的G 蛋白偶连受体交互蛋白。mCTRPl 编码基因位于11 号染色体,相对分子质量为21000 ,CTRP1cDNA 全长2512 bp ,编码281 个氨基酸,产生相对分子质量为31900的蛋白。
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