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细胞硬脂酰辅酶 A 去饱和酶（STEAROYL COA DESATURASE）活性光谱法定量检测试剂盒产品说明书
点击次数：2972 发布时间：2022/12/26 15:15:13
细胞硬脂酰辅酶 A 去饱和酶（STEAROYL COA DESATURASE）活性光谱法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
细胞硬脂酰辅酶 A 去饱和酶（STEAROYL COA DESATURASE）活性光谱法定量检测试剂是一种旨在通过底物硬脂酰辅酶 A 诱导还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸所还原的细胞色素 b5 的再氧化后吸光峰值的降低，即采用光谱法定量测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种原代细胞裂解萃取液样品（动物、人体）、纯化微粒体样品硬脂酰辅酶 A 去饱和酶的活性检测，以及抑制剂筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
技术背景
硬脂酰辅酶A去饱和酶（stearoyl CoA desaturase；SCD；EC1.14.19.1），又称为Δ9去饱和酶（delta-9 desaturase），是四类去饱和酶（Δ9、Δ6、Δ5、Δ4）之一，一种内质网整合性膜蛋白，参与内源性或外源性脂肪酸代谢的关键酶之一。通过限速催化氧化反应，在9号位上引入双键，由饱和脂肪酸底物，例如棕榈酸辅酶A（palmitoyl CoA）和硬脂酸辅酶A（stearoyl CoA），生物合成不饱和单脂肪酸，例如棕榈油酸辅酶A（palmitoleoyl CoA）和油酸辅酶A（oleoyl CoA），后者成为甘油三脂、胆固醇酯、磷脂、腊酯等脂类生物合成的底物，调节信号传导和细胞分化。哺乳动物的硬脂酰辅酶A去饱和酶分成5种亚酶：其中小鼠4种（SCD1至SCD4）、大鼠2 种（SCD1、SCD2）、人体2种（SCD1和SCD5）已经克隆证实。人体SCD1存在于大多数组织，而SCD5主要分布在脑组织和胰腺组织中。人体SCD1的活性与血清甘油三脂、极低密度脂蛋白（VLDL）水平直接相关，同时影响血清高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、总胆固醇水平，以及胆固醇转运、不饱和单脂肪酸的分泌和产生、细胞分化、胰岛素敏感性等。硬脂酰辅酶A去饱和酶成为药物靶标，用于治疗心血管疾病和肥胖症等。基于氧化型细胞色素b5（oxidized cytochrome b5），在还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）的存在下，受到内源性细胞色素b5还原酶的催化，转化为还原型细胞色素b5（reduced cytochrome b5），进而底物硬脂酰辅酶A，在硬脂酰辅酶A去饱和酶的催化下，转化为油酸辅酶A，同时还原型细胞色素b5再次被氧化（reoxidation）为氧化型细胞色素b5，在分光光度仪下，出现吸光值的变化（424nm 波长），来定量测定硬脂酰辅酶A去饱和酶的活性。其反应系统为：
产品内容
清理液（Reagent A） 毫升
裂解液（Reagent B） 毫升
缓冲液（Reagent C） 毫升
反应液（Reagent D） 微升
底物液（Reagent E） 微升
阴性液（Reagent F） 毫升
产品说明书 1 份
保存方式保存清理液（Reagent A）在 4℃冰箱里，其余的保存在-20℃冰箱里；有效bao证 6 月
用户自备
1.5 毫升离心管：用于样品操作的容器
15 毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
细胞刮脱棒：用于细胞脱离
DOUNCE 匀浆器：用于裂解细胞
4℃（微型）台式离心机：用于样品处理
4℃超速离心机：用于样品处理
恒温水槽或培养箱：用于样品反应孵育
比色皿或 96 孔板：用于光谱分析的容器
分光光度仪或酶标仪：用于光谱分析
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