实验步骤
一、 测定准备
1． 准备好待测样品，置于冰槽里
2． 设定好荧光分光光度仪：激发波长 485±10nm，散发波长 530±12.5nm，并置零
3． 实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent A）置于冰槽里融化。然后移出 xx 微升稀释液（Reagent B）到新的 1.5 毫升离心管，加入 xx 微升染色液（Reagent A），混匀后，用锡纸包裹，标记为染色工作液（5 次测定量），放在暗室里。然后进行下列操作。
二、 构建标准曲线
1． 准备好 5 个 1.5 毫升离心管，标记为 1 至 5 号管
2． 分别加入 xx 微升稀释液（Reagent B）到每个离心管
3． 移取 xx 微升标准液（Reagent C）到 1 号管，混匀
4． 小心移取 xx 微升 1 号管稀释的标准液（Reagent C）到 2 号管，混匀
5． 小心移取 xx 微升 2 号管稀释的标准液（Reagent C）到 3 号管，混匀
6． 小心移取 xx 微升 3 号管稀释的标准液（Reagent C）到 4 号管，混匀
7． 将 1 至 5 号管放进冰槽里备用；标准管含量见下表
管号 稀释液（Reagent B） 标准液（Reagent C） 标准 DNA 总量
1 xx 微升 xx 微升 xx 纳克/毫升
2 xx 微升 xx 微升 1 号管 xx 纳克/毫升
3 xx 微升 xx 微升 2 号管 xx 纳克/毫升
4 xx 微升 xx 微升 3 号管 xx 纳克/毫升
5 xx 微升 空对照 0
8． 移取 xx 微升含有染色液（Reagent A）和稀释液（Reagent B）的染色工作液到新的比色皿
9． 加入 100 微升上述配制的标准液
10．室温下，孵育 5 分钟，避免光照
11．即刻放进荧光分光光度仪测读：获得相对荧光单位（Relative Fluorescence Unit；RFU）
12．重复实验步骤 8 至 11 四次
13．绘制标准曲线：纵座标（Y 轴）为相对荧光单位（RLU）；横坐标（X 轴）为 DNA 含量（纳克/毫升）
三、 样品检测
1． 移取 xx 微升含有染色液（Reagent A）和稀释液（Reagent B）的染色工作液到新的比色皿
2． 加入 100 微升待测样品
3． 室温下，孵育 5 分钟，避免光照
4． 即刻放进荧光分光光度仪测读：获得相对荧光单位（Relative Fluorescence Unit；RFU）
5． 根据标准曲线获得样品对应 RNA 含量（纳克/毫升）
注意事项
1． 本产品为 25 次操作，包括标准曲线测定
2． 整个操作须带手套，建议使用滤芯枪头，并格外小心，防止降解 RNA
3． 建议所有的操作用品属于 RNA 专用
4． 使用新鲜配制的染色工作液，务必不要超过 2 小时，且注意避光
5． 孵育时，避免光照
6． 系统检测，标准曲线测定 1 次即可；如果仪器更换，则需要重新测定 1 次
7． 如果荧光读数过高，可以相应稀释样品量
8． 盐类、尿素、乙醇、lv仿、去垢剂、蛋白、琼脂糖不会干扰检测3
9． 如果样品中含有 DNA，建议使用 5 单位 DNA 酶，37℃孵育 90 分钟预处理
10．本公司提供系列 RNA 检测试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定高度敏感
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS20129 RNA 荧光（RiboGreen）定量检测试剂盒 20 次
G&VS20129A 染色液（Reagent A） 微升
G&VS20129B 稀释液（Reagent B） 毫升
G&VS20129C 标准液（Reagent C） 毫升
试剂盒订购信息
产品编号 产品名称 规格
G&VS12046 DEPC 水 500 毫升
G&VS12047 DMDC 水 500 毫升
G&VS20016.1 DEPC 处理试剂盒 100 次
G&VS20016.2 DMDC 处理试剂盒 100 次
G&VS12039.1 RNA 样品储存液 50 毫升
G&VS12039.2 纯化 RNA 样品储存液 50 毫升
G&VS20101 mRNA 纯化树脂再生试剂盒 20 次
G&VS20127 RNA 比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS20129 RNA 荧光（RiboGreen）定量检测试剂盒 20 次
