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过氧化氢酶(CAT)测试盒(可见光法)
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详细内容
货号:XYP9092947
过氧化氢酶(CAT)测试盒说明书
一、测定原理:
过氧化氢酶(Catalase)分解 H2O2 的反应可通过加入钼酸铵而迅速中止,剩余的 H2O2 与钼酸铵作用产
生一种淡黄色的络合物,在 405nm 处测定其变化量,可计算出 CAT 的活力。
二、试剂组成与配制:
试剂一:液体 100ml×1 瓶,4℃保存 6 个月。
试剂二:底物液体 10ml×1 瓶,4℃保存 6 个月。
试剂三:显色粉剂×1 瓶,4℃保存 6 个月。加双蒸水至 100ml 溶解,4℃保存 1 个月。(如果底
部有不溶粉末沉淀,直接取上清使用,不影响测定结果)
试剂四:液体 10ml×1 瓶,4℃保存 6 个月。天冷时会凝固,临用前 37℃水浴至透明方可使用。
三、操作步骤:
(一)、血清(浆)的检测:
1、操作表(如):


注:一般样本没有溶血、脂血等显著差异情况,对照管的样本变更为双蒸水,做 1~2 管对照即可;如需做样本自身对照,则试剂盒所测定样本数量减至 48 样。
[注]:为方便操作,您可将测试前的准备工作做好,编好试管,加入样本 0.1ml及试剂一 1ml,然后将所有的管子均放入 37℃水浴箱中预温 3-5 分钟。
测试时,管中加入试剂二 0.1ml,同时准确记时,并立即混匀,放入 37℃水浴中,当反应到 1 分钟时立即加入显色剂终止反应,混匀。
依次再测第二﹑第三… 对照管和测定管。每次均要将对照管及测定管同时测定。
(二)、全血的检测:
1、1﹕99 溶血液的制备:取 50µl 全血加双蒸水至 5ml 充分混匀后放置 10 分钟,待测。
2、操作表:

(三)、组织样本的检测:
1、组织匀浆液的制备:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9 的比例加入 9
倍体积的生理盐水,冰水浴条件下,制备成 10%的组织匀浆,2500 转/分离心 10 分钟,取上清,再用生
理盐水稀释成最佳取样浓度,待测(最佳取样浓度摸索见附录)。
3、操作表

注:一般样本没有高脂等导致显著差异情况,对照管的样本更换成双蒸水,做 1~2 管对照即可。如需做
样本自身对照,则试剂盒所测定样本数量减至 48 样。
注:
1、 测定血清和血浆时,如果样本不溶血,每批样本只需要随机挑 2 个样本做对照或者用双蒸水代替样本做对照;如果样本溶血的话,必须每个样本都要做对照。
2、 测定组织匀浆时,如果样本不是高脂,每批样本只需要随机挑 2 个样本做对照或者用双蒸水代替样本做对照;如果样本高脂,必须每个样本都要做对照。
3、 测定全血时,必须每个样本都要做对照。
4、本试剂盒亦可用酶标仪读数(即在反应完后取 200ul 进孔板 405nm 读数,计算公式斜率倒数变为
235.65 代入计算)。
附录Ⅰ:最佳取样浓度摸索
一、样本来源:正常小鼠肝组织
二、前处理:
10%匀浆液的制备:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9 的比例,加入 9 倍体积的生理盐水,冰水浴条件下机械匀浆,制成 10%的组织匀浆,2500 转/分,离心 10 分钟,取上清液待测;10%的匀浆液再用生理盐水稀释成不同的浓度: 5%、2%、1%、0.5%、0.25%、0.125%
三、操作表:
注:一般样本没有高脂等导致显著差异情况,对照管的样本更换成双蒸水,做 1~2 管
对照即可。如需做样本自身对照,则试剂盒所测定样本数量减至 48 样。
四、检测结果:
五、小鼠组织最佳取样浓度的摸索曲线:
参考取样浓度:小鼠肝脏匀浆为 0.25%~1%。在其范围内酶曲线通过回归曲线的处理,相对成正比关系。
若取样浓度过大或过少,则在实验结束后,在进行统计学处理时会出现无显著差异。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:过氧化氢酶(CAT),过氧化氢酶(CAT)测试盒,可见光法
















