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总抗氧化能力(DPPH法)测试盒/分光光度法
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详细内容
货号:XYO9040
总抗氧化能力(DPPH法)测试盒说明书
注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
测定原理:
DPPH 为稳定的自由基 ,溶于甲醇、乙醇等极性溶剂中,在 515nm 处有最大吸收。向 DPPH 溶液中加入抗氧化剂时,会发生脱色反应,因此可用吸光度的变化并以 Trolox 作为对照体系量化抗氧化物质的抗氧化能力。
自备实验用品:
恒温水浴锅、低温离心机、分光光度计、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体 60mL×1 瓶,使用前预冷。
试剂一:液体 60mL×1 瓶,避光保存。
样品的制备:
(1) 血清、血浆、唾液或尿液等液体样品血浆(制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝,不宜使用 EDTA 抗凝)4℃,5000rpm 离心 10min,取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定,也可以-80℃冻存(不宜超过 30d)后再测定。
(2) 组织样品
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
(3)细胞样品
按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎(功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
操作步骤:
1、 分光光度计预热 30min,调节波长至 515nm。
2、操作表(在 EP 管中反应)

只需测定一次,若 A 测定小于 0.2,需用提取液稀释后检测。
总抗氧化能力计算公式:
1、以自由基清除率表示:
DPPH 自由基清除率(%)=(A 空白-A 测定)÷A 空白×100%
2、以标准曲线上获得的抗氧化剂 Trolox 的量表示:

注意事项:
1.尽量避免使用在酸性条件下呈红色或接近红色的试剂,否则对本试剂盒的检测结果产生干扰。
2.样品中不宜添加 Tween、Triton 和 NP-40 等去垢剂和 DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的还原剂。
3.若液体样本为碱性,需要用提取液稀释至酸性后再检测。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:总抗氧化能力(DPPH法),总抗氧化能力(DPPH法)测试盒,分光光度法
















