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6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGDH)测试盒/分光光度法
价格：￥ 563
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:43
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货号：XYP9076418
6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGDH)测试盒说明书
注 意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
磷酸戊糖途径途径中 6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH）和 6PGDH 依次催化 NADPH 合成，与能量的平衡、生长速率和细胞活力等密切相关。此外，6PGDH 逆境生理中具有重要作用。
测定原理：
6PGDH 催化 6-磷酸葡萄糖酸和 NADP+生成 NADPH，NADPH 在 340 nm 有特征吸收峰，而 NADP+没有；通过测定 340nm 吸光度增加速率，计算 6PGDH 活性。
自备仪器和用品：
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL 石英比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 47.5mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存。
试剂三：粉剂×1 瓶，-20℃保存。
粗酶液提取：
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 1000~5000：1 的比例（建议 2000 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
测定操作：
1. 分光光度计预热 30min，调节波长到 340 nm，蒸馏水调零。
2. 将试剂二和试剂三转移至试剂一中充分溶解；在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 10min 以上；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
3. 取 1mL 石英比色皿，依次加入 50µL 样本和 950µL 试剂一，于 340nm 处测定 3min 内吸光值变化，第 10 s吸光值记为 A1，第 190s 吸光值记为 A2。△A=A2-A1
注意：空白管只需要做一次。
计算公式：
1、血清（浆）6PGDH 活力的计算:
单位的定义：每 mL 血清（浆）每分钟生成 1 nmol 的 NADPH 定义为一个酶活力单位。
6PGDH（nmol/min/mL）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷V 样÷T=1071.8×ΔA
2、组织、细菌或细胞中 6PGDH 活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟生成 1 nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。
6PGDH（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=1071.8×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每 g 组织每分钟生成 1 nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。
6PGDH（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(W× V 样÷V 样总) ÷T=1071.8×ΔA÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟生成 1 nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。
6PGDH（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(2000×V 样÷V 样总) ÷T=0.536×ΔA
V 反总：反应体系总体积，1×10-3 L；ε：NADPH 摩尔消光系数，6.22×103L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V 样：加入样本体积，0.05 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，3 min；Cpr：样本
蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；2000：细菌或细胞总数，2000 万。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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