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硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)测试盒/微量法
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详细内容
货号:XYG90007
硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)测试盒说明书
注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
TPX 属于过氧化物酶家族,在体内主要通过还原过氧化氢和一些氢过氧化物来实现抗氧化作用,功能与GPX 类似,也是谷胱甘肽氧化还原循环关键酶之一。TPX 普遍存在于各种生物体内,如酵母、植物、动物、原生动物、寄生虫、细菌和古细菌,在进化上高度保守。TPX 与细胞增殖、分化、细胞凋亡及肿 瘤发生调控密切相关。TPX 的主要功能包括细胞脱毒、抗氧化和调节由过氧化氢介导的信号转导和免疫反应。
测定原理:
TPX 催化 H2O2氧化二硫苏糖醇(DTT),H2O2的吸收波长为 240nm,通过测定 240nm 吸光度的下降速率,即可计算出 TPX 活性。
自备仪器和用品:
低温离心机、水浴锅、可调节移液器、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)、和蒸馏水
试剂组成和配制:
试剂一:液体 120mL×1 瓶,室温保存。
试剂二:液体 20mL×1 瓶,- 20℃保存。
试剂三:液体 2mL×1 支,4℃。
粗酶液提取:
1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心 10min,取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500万细胞加入 1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 8000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
3. 血清等液体:直接测定。
TPX 测定操作:
取微量石英比色皿或 96 孔板,加入 4 µL 上清液,180 µL 试剂二,16 µL 试剂三,迅速混匀后于240 nm 测定 10s 和 130s 吸光度,记为 A1 和 A2。
TPX 活性计算公式:
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下


仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX,硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)测试盒,微量法
















