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亮氨酸氨基肽酶(LAP)测试盒/微量法
价格：￥ 1195
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:49:03
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亮氨酸氨基肽酶（LAP）测试盒说明书
注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
LAP 是一类能水解肽链 N-末端为亮氨酸的酶,广泛存在于肝、肾、胰等组织中,尤其以肝脏中含量最为丰富。各类肝 病 患者因肝细胞损伤,血清 LAP 的活性均有不同程度的升高,因此,血清 LAP 活性的检测能从不同侧面反映各种肝 病的发生和发展。
测定原理:
LAP 分解 L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在 405nm 有 吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算 LAP 活性。
自备用品:
酶标仪/可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、96 孔板/微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 15mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存;
样本的前处理:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 1000~5000:1 的比例(建议 2000 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
LAP 测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 405nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂二转移至试剂一中充分溶解(如较难溶解,可 50℃水浴加热约 30min 促进溶解);在 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
3、 在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 50µL 样本和 150µL 试剂一,混匀后立即记录 405nm 处初始吸光值A1 和 2min 后的吸光值 A2,计算 ΔA=A2-A1。
注意事项:若ΔA 大于 0.5,需将酶液用提取液稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数。使 A2-A1 小于 0.5,可提高检测灵敏度。
LAP 活力单位的计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
b.用 96 孔板测定的计算公式如下
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