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抗坏血酸氧化酶(AAO)测试盒/分光光度法
价格：￥ 298
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:49:03
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详细内容
货号：XYV9008
抗坏血酸氧化酶（AAO）测试盒说明书
注 意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
AAO 是定位于植物细胞壁的糖蛋白,属“蓝铜氧化酶”家族。细胞壁内的抗坏血酸和 AAO 与细胞壁的代谢和生长有着密切的联系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通过质膜上的细胞色素 b 还原,该过程中电子的跨膜运输能够促 进 细 胞生长。
测定原理:
AAO 可直接氧化 AsA,通过测定 AsA 的氧化量,可计算得 AAO 活力。
实验中所需仪器及设备:
低温离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 60mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×2 瓶，4℃避光保存。
粗酶液提取:
按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行
冰浴匀浆。16000g,4℃离心 10min,取上清置冰上待测。
AAO 测定操作:
1. 分光光度计预热 30 min，调节波长到 265 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在 25℃水浴锅中预热 30 min。
3. 取 1 瓶试剂三，加入 2mL 蒸馏水充分溶解；配好的试剂三 3 天内用完。
4. 工作液的配制：将试剂二与试剂三按 17(mL）:1(mL)的比例混合，用多少配多少。
5. 依次在 1 mL 石英比色皿中加入 100µL 上清液和 900µL 工作液，迅速混匀后在 265nm 测定 10 s 和 130 s 光吸收 A1 和 A2，△A =A1-A2。
AAO 活性计算公式:
(1). 按蛋白浓度计算
AAO 活性单位定义:25℃中每毫克蛋白每分钟氧化 1nmol AsA 为 1 个酶活单位。
(2). 按样本质量计算
AAO 活性单位定义:25℃中每克样本每分钟氧化 1nmol AsA 为 1 个酶活单位。
ε:AsA 在 265nm 处摩尔吸光系数为 5.42×104 L/mol/cm；d：比色皿光径（cm），1 cm；V 反总：反应体系总体积（L），1000µL=1×10-3 L；106：1mol=1×109nmol；Cpr：上清液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定，建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒；V 样：加入反应体系中上清液体积（mL），100µL=0.1 mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；W，样本质量，g；T：催化反应时间（min），2min。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：抗坏血酸氧化酶(AAO),抗坏血酸氧化酶(AAO)测试盒,分光光度法
