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半胱氨酸(Cys)含量测试盒/微量法
价格：￥ 425
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:49:03
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详细内容
货号： XYA9027
半胱氨酸（Cys）含量测试盒说明书
注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
蛋白质含有三种含硫氨基酸：甲硫氨酸、胱氨酸和 Cys。其中，Cys 是一种含有巯基的含硫氨基酸，从甲硫氨酸转化而来，并且可与胱氨酸互相转化。Cys 参与蛋白质二硫键的形成，经常是蛋白质活性中心的组成部分，还可以为其它生理生化反应提供巯基。此外，Cys大量积聚在皮肤和粘膜表面，在角蛋白生成中维持重要的巯基酶的活性，并且补充巯基，以维持皮肤的正常代谢，调节表皮最下层的色素细胞生成的底层黑色素。具有美白、解毒、改善炎症和过敏性皮肤等作用。
测定原理:
Cys 还原磷钨酸生成钨蓝，在 600nm 处有吸收峰；通过 600nm 吸光度，计算 Cys 含量。
自备仪器和用品:
低温离心机、可调式移液枪、酶标仪、96 孔板、85％磷酸和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。用前 1 天，向试剂三中加 0.5mL 蒸馏水充分溶解，再加 85％磷酸 0.125mL，混匀后盖紧（防止水分散失）沸水浴 2h；冷却后加 2mL 蒸馏水，4℃可保存2 周。
标准品：粉剂×1 瓶，临用前加 10 mL 蒸馏水，充分溶解。1µmol/mL 标准液，4℃避光保存。用不完的试剂 4℃可保存 3 天。
半胱氨酸提取:
1、 液体样品中半胱氨酸提取:取 0.1mL 液体样品,加试剂一 0.9mL,充分混匀,8000g4℃离心 10min,取上清液,待测。
2、 组织中半胱氨酸提取:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆,8000g 4℃离心 10 min,取上清液待测。
3、 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
测定操作:
1.酶标仪预热 30 min，调节波长到 600 nm。
2. 空白管：取 96 孔板，加入 20µL 蒸馏水，160µL 试剂二，20µL 试剂三，混匀后室温静置15 min，于 600nm 处测定吸光值，记为 A 空白管。
3. 标准管：取 96 孔板，加入 20µL 标准液，160µL 试剂二，20µL 试剂三，混匀后室温静置15 min，于 600nm 处测定吸光值，记为 A 标准管。
4. 测定管：取 96 孔板，加入 20µL 上清液，160µL 试剂二，20µL 试剂三，混匀后室温静置15 min，于 600nm 处测定吸光值，记为 A 测定管。
注意:空白管和标准管只需要做一次。
计算公式:
1. 按液体样品的体积计算:
半胱氨酸含量(µmol/mL)=[C 标准品×V 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×(V 样总÷V 样)=1×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)
2. 按样本质量计算:
半胱氨酸含量(µmol/g 鲜重)=[C 标准品×V 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×(V样总÷V 样)÷W=1×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管) ÷W
3. 按照蛋白浓度计算:
半胱氨酸含量(µmol /mg prot)= [C 标准品×V 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]÷(V样×Cpr)=1×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管) ÷Cpr
4. 按细胞数量计算:
氨基酸含量(µmol /104 cell)=[C 标准品×V 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)] ×(V 样总÷V 样×细胞数量)=1×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管) ÷细胞数量
C 标准品:标准品浓度,1µmol/mL;V 标准品:反应体系中加入标准品体积,0.1 mL;V 样:反应体系中加入样品提取液体积,0.1 mL;V 样总:加入提取液体积,1mL。W:样品质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL。
注意事项:
最低检出限为 100µmol/L。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：半胱氨酸(Cys),半胱氨酸(Cys)含量测试盒,微量法
