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尿素氮(BUN)测试盒/微量法
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详细内容
货号:XYP9076479
尿素氮(BUN)测试盒说明书
注 意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物,在尿酶催化下分解转化成氨。血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。
测定原理
样本中尿素氮在氯化高铁一磷酸溶液中与二乙酰一肟和硫胺脲共煮,生成一种红色的二嗪化合物,其颜色的深浅与尿素氮含量成正比,采用二乙酰一肟法测定尿素氮含量。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、恒温水浴锅。
试剂组成和配制
试剂一:液体 6mL×1 瓶,4℃避光保存,
试剂二:液体 60mL×1 瓶,4℃避光保存。
样品处理
1. 组织:按照质量(g):蒸馏水体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL 蒸馏水)加入蒸馏水,匀浆后于 25℃,10000g 离心 10min,取上清待测。
2. 细胞:按照细胞数量(104个):蒸馏水体积(mL )为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL蒸馏水),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 4℃,10000g离心 10min,取上清置于冰上待测。
3. 血清或其它液体:直接检测。
测定操作

尿素氮含量计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定回归方程为 y =2.048x + 0.0229,R2 = 0.9943;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。
1、按照血清(浆)或者细胞培养液体积计算
尿素氮含量(mg/mL)= (△A-0.0229)÷2.048=0.4882×(△A-0.0229)
2、按照样本质量计算
尿素氮含量 mg/g 鲜重)= (△A-0.0229)÷2.048×V 样总÷W=0.4882×(△A-0.0229)÷W
3、按照蛋白浓度计算
尿素氮含量(mg/mg prot)= (△A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.4882×(△A-0.0229) ÷Cpr
V 样总:加入提取液体积,1 mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;
b.用 96 孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定回归方程为 y = 1.024x + 0.0229,R2 = 0.9943; x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。
1、按照血清(浆)或者细胞培养液体积计算
尿素氮含量(mg/mL)= (△A-0.0229)÷1.024=0.9766×(△A-0.0229)
2、按照样本质量计算
尿素氮含量(mg/g 鲜重)= (△A-0.0229)÷1.024×V 样总÷W=0.9766×(△A-0.0229)÷W
3、按照蛋白浓度计算
尿素氮含量(mg/mg prot)= (△A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.9776×(△A-0.0229) ÷Cpr
V 样总:加入提取液体积,1 mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500 万。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:尿素氮(BUN),尿素氮(BUN)测试盒,微量法
















