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丙酮酸(PA)含量测试盒/微量法
价格：￥ 367
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:49:03
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详细内容
货号： XYG9027
丙酮酸(PA)含量测试盒说明书
注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
丙酮酸通过乙酰 CoA 连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢，起着重要的枢纽作用。
测定原理：
丙酮酸与 2,4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，在碱性溶液中呈色。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 2.5mL×1 瓶， 4℃保存；
试剂二：液体 12.5mL×1 瓶， 4℃保存。
丙酮酸提取：
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次），静置 30min， 8000g，25℃离心 10min，取上清待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆，静置 30min，8000g，25℃离心 10min，取上清待测。
3、血清（浆）样品：按照血清（浆）体积（mL）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议取 0.1mL 血清（浆）加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆，静置 30min， 8000g，25℃离心 10min，取上清待测。
测定步骤：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 520nm，蒸馏水调零。
2、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 75µL 样本和 25µL 试剂一，混匀，静置 2min，加入125µL 试剂二，混匀，于 520nm 波长处测定管吸光值 A。
丙酮酸含量计算：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、标准条件下测定回归方程为 y = 0.0466x + 0.0675； x 为丙酮酸含量（µg/mL），y 为吸光值。
2、按照血清（浆）体积计算
丙酮酸含量（µg/mL）= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷（V3×V1÷V2）=214.6×(A-0.0675)
3、按照蛋白浓度计算
丙酮酸含量（µg/mg prot）=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V1×Cpr)=21.46×(A-0.0675) ÷Cpr
4、按照样品质量计算
丙酮酸含量（µg/g 鲜重）= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(W ×V1÷V2）=21.46×(A-0.0675) ÷W
3、按照细菌或细胞密度计算
丙酮酸含量（µg/104 cell）＝[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷（500×V1÷V2）=0.043×(A-0.0675)
V1：加入反应体系中样本体积，0.075mL；V2：加入提取液体积，1 mL；V3：加入血清（浆）体积，0.1 mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500 万。
b.用 96 孔板测定的计算公式如下
1、标准条件下测定回归方程为 y = 0.0233x + 0.0675； x 为丙酮酸含量（µg/mL），y 为吸光值。
2、按照血清（浆）体积计算
丙酮酸含量（µg/mL）= [(A-0.0675)÷0.0233×V1]÷（V3×V1÷V2）=429.2×(A-0.0675)
3、按照蛋白浓度计算
丙酮酸含量（µg/mg prot）=[(A-0.0675)÷0.0233×V1]÷(V1×Cpr)=42.92×(A-0.0675) ÷Cpr
4、按照样品质量计算
丙酮酸含量（µg/g 鲜重）= [(A-0.0675)÷0.0233×V1]÷(W ×V1÷V2）=42.92×(A-0.0675) ÷W
3、按照细菌或细胞密度计算
丙酮酸含量（µg/104cell）＝[(A-0.0675)÷0.0233×V1]÷（500×V1÷V2）=0.086×(A-0.0675)
V1：加入反应体系中样本体积，0.075mL；V2：加入提取液体积，1 mL；V3：加入血清（浆）体积，0.1 mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500 万。
注意：
最低检测限为 1µg/mL 或 1µg/g 鲜重或 10ng/mg prot
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：丙酮酸(PA),丙酮酸(PA)含量测试盒,微量法
