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Jurkat (E6)-RFP-Puro稳转株

价格:¥ 电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/15 11:08:30

产品摘要:Jurkat (E6)-RFP-Puro稳转株源自人急性 T 淋巴细胞白血病的永生细胞系,为悬浮细胞,具有 T 细胞特性,在免疫学、细胞信号传导、癌症研究等领域应用广泛。

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详细内容

Jurkat (E6)-RFP-Puro稳转株

英文名称

Jurkat (E6)-RFP-Puro polyclonal stable cell line

产品货号

XY-H1119

中文名称

RFP 标记的 Jurkat (E6) 稳转株

Lot number

Jurkat (E6)-10A2P

细胞规格

复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞

细胞形态

淋巴母细胞样

生长特性

悬浮生长

细胞株

构建流程

(1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒;

(2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞;

(3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株;

(4)稳转株质检(COA)。

完全培养基

RPMI-1640+10%FBS + 1% P/S(选择添加)

培养条件

(1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。

细胞冻存

无血清冻存液

存储条件

液氮

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细胞背景

Jurkat 细胞特性:Jurkat 细胞是源自人急性 T 淋巴细胞白血病的永生细胞系,为悬浮细胞,具有 T 细胞特性,在免疫学、细胞信号传导、癌症研究等领域应用广泛。

E6 亚系特点:Jurkat (E6) 是 Jurkat 细胞的一个亚系,可能在某些特性上与其他亚系或原始 Jurkat 细胞有所不同,比如在细胞表面分子表达、信号通路活性或对某些刺激的反应等方面,但具体差异需要根据相关研究来明确。

构建过程

载体构建:一般会选择慢病毒载体或逆转录病毒载体,将 RFP 基因和 Puro 抗性基因插入到载体中。RFP 基因用于实现后续的荧光标记观察,Puro 抗性基因则作为筛选标记,以便使成功转染的细胞能在含有嘌呤霉素的培养基中存活。

细胞转染与筛选:通过病毒介导的基因转移方法,把构建好的载体导入 Jurkat (E6) 细胞。之后利用含有嘌呤霉素的培养基进行筛选,只有那些成功整合了载体并表达 Puro 抗性蛋白的细胞才能存活,这些细胞就是初步获得的 Jurkat (E6)-RFP-Puro 稳转株。为获得更均一的细胞群体,还可能采用有限稀释法或流式细胞分选等技术进行单克隆化培养。

应用领域

细胞生物学研究:借助 RFP 的荧光特性,可在荧光显微镜下实时观察 Jurkat (E6) 细胞的增殖、凋亡、迁移等过程,也可用于研究细胞内蛋白质的定位与转运等。

免疫学研究:由于 Jurkat 细胞是 T 淋巴细胞来源,Jurkat (E6)-RFP-Puro 稳转株可用于研究 T 细胞相关的免疫反应机制,如 T 细胞受体信号传导、细胞因子分泌等。例如,通过观察 RFP 标记的细胞在与抗原呈递细胞共培养时的行为变化,来了解 T 细胞的激活过程。

药物研发与筛选:可用于高通量筛选针对 T 细胞白血病的药物或小分子抑制剂。通过检测 RFP 荧光强度变化或结合细胞存活率检测方法,评估药物对 Jurkat (E6) 细胞的抑制效果和毒性作用。

培养与维护

培养基选择:通常使用含 10% 胎牛血清(FBS)的 RPMI 1640 培养基,并添加 1% 双抗(青霉素 / 链霉素)防止细菌污染。为维持细胞对嘌呤霉素的抗性,需添加适量嘌呤霉素,一般浓度在 0.5 - 2 µg/mL,具体浓度需通过预实验优化。

培养条件:培养条件为 37℃、5%CO2 和饱和湿度的培养箱。

传代与密度:作为悬浮细胞,传代时细胞密度建议维持在 0.3 - 1×106 cells/mL,传代比例可按 1:3 - 1:5 进行稀释,每 2 - 3 天更换一次培养基。

冻存与复苏:冻存细胞时,使用含有 90% FBS 和 10% DMSO(或专用细胞冻存液)的冻存液,将细胞密度调整为 1 - 5×106 cells/mL。复苏细胞时,应快速将冻存管在 37℃水浴中解冻,离心去除冻存液后,加入含有嘌呤霉素的新鲜培养基进行培养。

仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。

以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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