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NK-92MI-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:30
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详细内容
NK-92MI-GFP-Puro稳转株
英文名称 | NK-92MI-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1121 |
中文名称 | GFP 标记的 NK-92MI 稳转株 |
Lot number | NK-92MI-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | NK-92MI细胞专用培养基 (VGM-0011-0500) |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
细胞背景
来源：NK-92MI 细胞是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的 50 岁白人男性外周血单核细胞衍生而来的 IL-2 依赖型 NK 细胞株 NK-92，通过微粒体基因转化法用逆转录病毒 MFG-hIL-2 载体携带的人 IL-2 cDNA 进行转化得到的 IL-2 非依赖的 NK 细胞株。
特性：悬浮生长，呈聚团状，细胞团较大时需吹打成小团，以防止团块中间的细胞因营养不足而死亡。对很多恶性细胞有细胞毒性，铬释放试验显示它能杀死 K562 和 Daudi 细胞。
构建过程
通常是将携带 GFP 基因和嘌呤霉素抗性基因的慢病毒载体，通过病毒介导的基因转移方法导入 NK-92MI 细胞。利用慢病毒载体可将外源 DNA 整合到宿主细胞基因组的特性，在含有嘌呤霉素的培养基中进行筛选，只有成功整合了载体并表达 GFP 和嘌呤霉素抗性基因的细胞才能存活，从而获得稳定表达 GFP 的 NK-92MI-GFP-Puro 稳转株。
应用领域
细胞示踪与免疫研究：在免疫细胞治疗研究中，可将 NK-92MI-GFP-Puro 稳转株回输到体内，通过检测 GFP 的荧光信号，追踪 NK 细胞在体内的分布、迁移和归巢情况，了解其在免疫反应中的作用机制。例如，研究 NK 细胞对肿瘤细胞的杀伤作用，观察其在肿瘤组织中的浸润情况。
药物研发与筛选：可用于高通量筛选增强或抑制 NK-92MI 细胞功能的药物或小分子抑制剂。通过检测 GFP 荧光强度变化或结合细胞存活率检测方法，评估药物对 NK-92MI 细胞的作用效果和毒性。例如，筛选能够增强 NK 细胞抗肿瘤活性的免疫调节药物。
基因功能研究：作为模型细胞株，用于研究与 NK 细胞功能相关的基因表达和调控机制。通过对 GFP 标记的细胞进行荧光激活细胞分选（FACS），可以获得高纯度的目的细胞群体，便于进行后续的基因表达分析、蛋白质组学研究等。
培养与维护
培养基选择：通常使用 α - MEM 培养基，添加 12.5% 胎牛血清（FBS）、12.5% 马血清，以及 0.2 mM 肌醇、0.1 mM 巯基乙醇、0.02 mM 叶酸。为维持细胞对筛选标记的抗性，需添加适量嘌呤霉素，一般浓度在 0.5 - 2 µg/mL，具体浓度需通过预实验优化。
培养条件：培养条件为 37℃、5%CO2 和饱和湿度的培养箱。
传代与密度：作为悬浮细胞，传代时细胞密度建议维持在 0.3 - 1×106 cells/mL，传代比例可按 1:3 - 1:5 进行稀释，每 2 - 3 天更换一次培养基。
冻存与复苏：冻存细胞时，使用含有 90% FBS 和 10% DMSO（或专用细胞冻存液）的冻存液，将细胞密度调整为 1 - 5×10⁶ cells/mL。复苏细胞时，应快速将冻存管在 37℃水浴中解冻，离心去除冻存液后，加入含有筛选药物的新鲜培养基进行培养。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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