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A549-RFP-Puro单克隆株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:30
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详细内容
A549-RFP-Puro单克隆株
英文名称 | A549-RFP-Puro monoclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1128 |
中文名称 | RFP 标记的 A549 单克隆株 |
Lot number | A549-10A2S |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）采用无限稀释法筛选单克隆株； （5）单克隆株质检（COA）。 |
完全培养基 | F-12K + 10 % FBS + 1 % P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
A549-RFP-Puro 单克隆株概述
1. 基本信息
细胞来源：
A549 细胞是源自人类肺癌（腺癌）的永生细胞系，常用于肺癌研究、药物筛选及细胞生物学实验。
标记与筛选特性：
RFP：红色荧光蛋白（Red Fluorescent Protein），通过基因工程手段稳定转染至细胞中，用于实时追踪细胞位置、观察细胞形态或监测基因表达。
Puro：嘌呤霉素（Puromycin）抗性基因，使细胞在含有嘌呤霉素的培养基中存活，用于筛选成功转染的单克隆细胞株。
2. 构建流程
载体构建：
将 RFP 编码基因与 Puro 抗性基因插入到合适的表达载体（如慢病毒载体、质粒载体）中，形成重组载体。
细胞转染：
通过病毒感染（慢病毒 / 逆转录病毒）或化学转染（如脂质体）将重组载体导入 A549 细胞。
单克隆筛选：
在含有嘌呤霉素的培养基中培养细胞，未成功转染的细胞死亡，存活细胞为阳性克隆。
通过有限稀释法或流式细胞术（FACS）分离单细胞，培养形成单克隆株，确保每个克隆源自单个细胞且遗传背景一致。
验证与扩增：
荧光显微镜检测 RFP 表达强度及均一性。
测序验证目的基因插入位点及序列正确性。
扩大培养并冻存备用。
3. 应用场景
细胞示踪与成像：
RFP 荧光信号可通过荧光显微镜、流式细胞术或活体成像技术（如小动物成像）追踪细胞在体外或体内的行为（如迁移、侵袭、增殖）。
药物筛选与毒性评估：
利用稳定表达 RFP 的细胞株建立高通量筛选模型，观察药物对细胞形态、荧光强度或存活状态的影响。
肿瘤研究：
用于构建荷瘤动物模型（如裸鼠移植瘤），监测肿瘤生长、转移及治疗反应。
基因功能研究：
结合 CRISPR-Cas9 等基因编辑技术，敲除 / 过表达目标基因后，通过 RFP 标记追踪细胞表型变化。
4. 优势与注意事项
优势：
单克隆株遗传均一性高，实验结果重复性好。
RFP 标记稳定性强，适用于长期追踪（相比瞬转荧光更持久）。
嘌呤霉素筛选效率高，可快速获得纯阳性细胞群。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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