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P388D1-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
P388D1-GFP-Puro稳转株
产品名称 | P388D1-GFP-Puro 稳转株 |
产品货号 | XY-M1156 |
中文名称 | GFP 标记的 P388D1 稳转株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
P388D1-GFP-Puro 稳转株概述
P388D1 细胞是源自小鼠淋巴瘤的巨噬细胞样细胞系，常用于免疫学、细胞生物学等研究。** 稳转株（稳定转染细胞株）** 是通过基因工程手段将外源基因稳定整合到细胞基因组中，使其能长期表达目标蛋白的细胞群体。**GFP（绿色荧光蛋白）和Puro（嘌呤霉素）** 分别作为报告基因和筛选标记，用于细胞转染后的筛选和可视化追踪。
关键特性
特性 说明
细胞来源 小鼠淋巴瘤细胞，巨噬细胞样特性，贴壁或半贴壁生长。
外源基因 - GFP：用于荧光显微镜下观察细胞形态、定位及示踪。
- Puro 抗性基因：通过嘌呤霉素筛选稳定转染的细胞克隆。
筛选方法 转染后使用嘌呤霉素（Puro）处理细胞，未成功整合抗性基因的细胞会被淘汰。
应用场景 - 细胞成像与动态追踪（GFP 荧光信号）。
- 信号通路研究、药物靶点验证、基因功能分析等。
构建流程（示意图）
载体构建
构建含 GFP 基因和 Puro 抗性基因的重组质粒（如慢病毒载体、质粒载体），通常由 CMV 等强启动子驱动表达。
细胞转染
通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒）将载体导入 P388D1 细胞。
筛选与克隆化
加入嘌呤霉素（浓度需预实验优化，通常 500–1000 ng/mL）培养 2–3 周，存活细胞形成稳定克隆。
通过有限稀释法或流式细胞术（FACS）筛选单克隆细胞，确保 GFP 表达均一性。
鉴定与扩增
荧光显微镜检测 GFP 表达强度，Western blot 验证蛋白水平，PCR 确认基因整合。
扩大培养并冻存备用（液氮或 - 80℃保存）。
应用优势
可视化追踪
GFP 荧光信号可实时观察细胞在体外培养或体内（如小鼠模型）的分布、迁移和增殖。
稳定遗传
外源基因整合至基因组，传代过程中不易丢失，适合长期实验（如慢性药物处理、细胞共培养）。
筛选高效性
嘌呤霉素筛选可快速富集阳性细胞，避免瞬时转染的表达波动。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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