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B16F10-GFP-Puro+ffluc单克隆株
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详细内容
B16F10-GFP-Puro+ffluc单克隆株
产品名称 | B16F10-ffluc2-GFP-Puro 单克隆细胞株 |
产品货号 | XY-M1248 |
中文名称 | ffluc2 和 GFP 双标的 B16F10 单克隆细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞(T25细胞瓶)或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株; (4)采用无限稀释法筛选单克隆细胞株; (5)单克隆细胞株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |

构建过程:通常是通过慢病毒转染等技术,将包含绿色荧光蛋白(GFP)基因、嘌呤霉素抗性基因(Puro)以及萤火虫荧光素酶(ffluc)基因的表达载体导入 B16F10 细胞中。经过筛选和克隆化培养,得到稳定表达这些基因的单克隆细胞株。例如,Imanis Life Sciences 构建的 b16f10 - fluc - neo/egfp - puro 细胞株,就是将 lv - fluc - p2a - neo 和 lv - egfp - pgk - puro 两种慢病毒载体转导到亲本 B16F10 细胞中,再用 G418 和嘌呤霉素进行筛选。
特点和应用
荧光标记特性:表达 GFP 使得细胞在荧光显微镜下能够发出绿色荧光,便于在细胞水平进行实时观察和追踪,例如用于研究细胞的迁移、分化等过程。ffluc 基因编码的萤火虫荧光素酶能够催化荧光素底物发光,通过生物发光成像技术,可以在活体动物体内对细胞进行性的定位和定量分析,常用于肿瘤模型的建立以及药物研发等领域,以观察肿瘤细胞在体内的生长、转移以及对药物的反应。
药物筛选标记:Puro 抗性基因的存在使得在细胞培养过程中,可以使用嘌呤霉素进行筛选,只有成功导入并稳定表达目的基因的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而保证细胞株的稳定性和纯度。
这种细胞株在癌症研究、药物研发以及细胞生物学等领域具有广泛的应用前景,为相关研究提供了有力的工具。但由于涉及到基因编辑和生物安全问题,在使用过程中需要遵循相关的生物安全规定和操作流程。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:B16F10-GFP-Puro+ffluc单克隆株,ffluc2,和,GFP,双标的,B16F10,单克隆细胞株,,B16F10,单克隆细胞株















