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NIH-3T3-GFP-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:21
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详细内容
NIH-3T3-GFP-Puro+ffluc稳转株
产品名称 | NIH/3T3-ffluc2-GFP-Puro 稳转细胞株 |
产品货号 | XY-M1259 |
中文名称 | ffluc2 和 GFP 双标的 NIH/3T3 稳转细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转细胞株； （4）稳转细胞株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 10% NEAA + 1%丙酮酸钠 + 10%谷氨酰胺 |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |
背景信息
NIH/3T3 细胞：是从 NIH Swiss 小鼠胚胎培养物中建立的高度接触抑制的连续细胞株，对肉瘤病毒的转化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感，常用于 DNA 转化及转染研究。
GFP：即绿色荧光蛋白，具有明亮的绿色荧光，激发 / 发射最大值为 482/502nm。在细胞生物学研究中，GFP 常用于细胞和细胞器的标记以及追踪启动子活性，便于直观地观察细胞内的各种生理过程。
Puro：即嘌呤霉素，是一种抗生素，Puro 基因作为筛选标记，使稳转株具有对嘌呤霉素的抗性，便于在细胞培养过程中通过添加嘌呤霉素来筛选和维持稳定转染的细胞。
ffluc：即萤火虫荧光素酶，是一种能够催化荧光素底物发生氧化反应并产生荧光的酶，可用于体外实验和体内成像，通过检测荧光信号的强度来反映细胞的活性、数量以及基因表达等情况。
构建过程
载体构建：将含有 GFP 基因、Puro 基因和 ffluc 基因的表达载体构建好，这些基因通常受各自的启动子调控，以确保在细胞内能够稳定表达。
转染：采用合适的转染方法，如脂质体转染、电穿孔等，将构建好的表达载体导入 NIH/3T3 细胞中。
筛选：在转染后的细胞培养体系中加入嘌呤霉素，只有成功转染了含有 Puro 基因表达载体的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活并继续生长，经过一段时间的筛选，即可获得稳定表达 GFP 和 ffluc 的 NIH-3T3-GFP-Puro+ffluc 稳转株。
应用领域
细胞追踪与示踪：利用 GFP 的荧光特性，可以在体外和体内实时追踪 NIH-3T3 细胞的迁移、分化等过程。例如，在肿瘤研究中，将 NIH-3T3-GFP-Puro+ffluc 稳转株注射到动物体内，通过荧光成像技术观察肿瘤细胞的生长、转移情况。
药物筛选与研发：可以用于评估药物对细胞的作用效果。通过检测 ffluc 的荧光强度变化来反映药物对细胞活性、代谢等方面的影响，从而筛选出具有潜在治疗作用的药物分子。
基因表达调控研究：借助 GFP 和 ffluc 作为报告基因，研究特定基因的启动子活性以及基因表达的调控机制。通过观察荧光信号的变化，了解不同条件下基因表达的变化情况。
培养要点
培养基：一般使用 DMEM-H 培养基，并添加 10% 的新生牛血清（CS）和 1% 的青霉素 / 链霉素（P/S）来提供细胞生长所需的营养物质和防止污染。
传代：当细胞密度达到 80%-90% 时，即可进行传代培养。传代比例一般为 1:3-1:6，每 2-3 天换液一次，传代周期为 48⁻⁷2 小时。
培养条件：需在气相为 95% 空气 + 5% CO2 、温度为 37℃的培养箱中培养，冻存条件为 60% 基础培养基 + 30% FBS+10% DMSO，液氮储存。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：NIH-3T3-GFP-Puro+ffluc稳转株,ffluc2,和,GFP,双标的,NIH/3T3,稳转细胞株,NIH/3T3,稳转细胞株
