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痰液基因组DNA提取试剂盒
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详细内容
痰液基因组DNA提取试剂盒
S p u t u m D N A e x t r a c t i o n k i t
( 离 心 柱 型 )
产品及特点:
本产品适合从 1ml 液化的痰液中分离纯化总 DNA(包括基因组 DNA、线粒体 DNA及可能存在的细菌、病毒 DNA)。被溶解的痰液经裂解及蛋白酶 K 消化后 DNA 将结合到纯化柱上,降解的蛋白与 PCR 抑制物则被过滤除去,DNA 经 Buffer W1 和 Buffer W2 洗涤后,用 Buffer EB 洗脱,即可用于各种分子生物学实验。它具有下列特点:
1. 简便快速;
2. 重复性好,产量高;
3. 完全去除污染物和抑制剂,便于下游应用。
产品货号:XY911301
产品规格:50T/850元、100T/1550元、200T/2750元
成分规格:
保存条件
蛋白酶 K 于-20℃,Buffer DT 于 4℃储存,其他试剂与物品储存于室温(15-25℃)。
使用方法
自备试剂
无水乙醇。
使用前准备
1. 如果离心机有制冷功能,请将温度设置到 25℃。
2. 将水浴锅温度设置到 56℃。
3. 根据试剂瓶标签上的指示在 Buffer W1 和 Buffer W2 中加入无水乙醇,并在标签的方
框中打勾作好“乙醇已加”的标记。
DNA 提取
1. 痰液化处理:估算痰液的体积,按痰液的 2 倍体积加入 Buffer SP,再加入 200 µl Buffer
DT,混匀使痰液充分液化。
2. 取 1ml 液化的痰液加入到 1.5ml 离心管中,10000rpm 离心 2 分钟,弃上清液。
3. 加入 200 µl Buffer GTL 和 20µl Proteinase K,旋涡振荡 15 秒混合均匀,再加入 200 µl
Buffer GL,充分混匀,56℃水浴 10-20 分钟至溶液清亮。
4. 冷却至室温,加入 200ul 无水乙醇,混匀。
5. 将一个离心吸附柱放入收集管中,将上一步所得溶液和絮状沉淀转移到吸附柱中,
12,000 rpm 离心 1 min,弃收集管中的滤液。
6. 向吸附柱内加入 500 µl 的 Buffer W1,室温 12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中滤液。
(注意:按要求在 Buffer W1 中加入无水乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发)
7. 向吸附柱内加入 600 µl Buffer W2,室温 12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中滤液。
(注意:Buffer W2 为浓缩液,按要求加入无水乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发)
8. 向吸附柱内加入 500 µl Buffer W2,室温 12,000 rpm 离心 2 min,弃收集管中滤液。
(注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响基因组 DNA 的后续使用)
9. 将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 塑料离心管(自备)中,加入 50 - 100 µl Buffer EB,
室温放置 2 min,12,000 rpm 离心 1 min,离心管底溶液即基因组 DNA。
(注意:为增加洗脱效率,可将洗脱液 Buffer EB 在 60℃预热。如需使用去离子水洗脱,可用 NaOH
调整其pH值在7.0 - 8.5之间,为了增加回收率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置2 min,
再次离心收集)
注意事项
●如 Buffer GTL 和 Buffer GL 产生沉淀,可在 56℃水浴溶解;
●所有离心步骤均为台式离心机。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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