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口腔拭子基因组DNA提取试剂盒
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详细内容
口腔拭子基因组DNA提取试剂盒
S w a b G e n o m i c D N A P u r i f i c a t i o n K i t
( 离 心 柱 型 )
产品及特点:
本试剂盒适用于口腔拭子基因组 DNA 提取。试剂盒采用了独特的细胞裂解体系,细
胞在裂解、蛋白变性降解、核酸/蛋白分离后,核酸特异吸附结合到硅胶膜上,通过简单
漂洗去除杂质,并快速纯化得到基因组 DNA。使用本试剂盒得到的基因组 DNA 无蛋白、
核酸酶污染,能满足基因检测、组织分型等所需要的 DNA 量,也可满足 PCR、酶切和杂
交等分子生物学实验。它具有下列特点:
1. 简便快速:可快速从口腔拭子中获得高纯度的基因组 DNA;
2. 安全:无需有机溶剂抽提,使用安全;
3. 稳定:所得 DNA 纯度高,重复性好,方便下游应用。
产品货号:XY910901
产品规格:50T/530元、100T/950元、200T/1770元
成分规格:
保存条件
Proteinase K 于-20℃,其他组分室温(15 - 25℃),可保存 12 个月。
使用方法
自备试剂:
无水乙醇、RNase A(可选)
(取样方式:使用棉签在面颊内擦拭 10 次,为保证样本不被食物或饮料污染,取样前 30 分钟内请勿
进食或饮水。)
1. 材料处理:将在面颊内擦拭过的棉签用剪刀将棉签部分从其杆上剪下,置于 2 ml 离心管中,加入 200 µl Buffer GTL。
(注意:如果需要去除 RNA,可加入 4 µl RNase A(100 mg/ml)溶液),振荡混匀,室温放置 5 min)
2. 加入 20 µl Proteinase K 溶液,涡旋 10 sec 混匀。
3. 加入 200 µl Buffer GL,充分颠倒混匀,70℃水浴 10 min。此时溶液应变清亮,简短离
心以去除管盖内壁的液滴,然后挤压去除拭子,将尽可能多的裂解液转移至新的离心
管中。
(注意:a.加入缓冲液 GL 时可能会产生白色沉淀,一般 70℃水浴时会消失,不会影响后续实验。如
溶液未变清亮,说明细胞裂解不,可能导致提取 DNA 量少和提取出的 DNA 不纯。b.如果由于拭
子上细胞数少导致提取的基因组 DNA 少于 1 µg,可以在添加缓冲液 GL 的同时添加 Carrier RNA(客
户自备))
4. 加 500 µl 无水乙醇,充分颠倒混匀,简短离心以去除管盖内壁的液滴。
(注意:加入无水乙醇后可能会出现絮状沉淀,但不影响 DNA 提取)
5. 将上一步所得溶液和絮状沉淀分批加入一个吸附柱中,10,000 rpm 离心 30 sec,倒掉
收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
6. 向吸附柱内加入 500 µl Buffer W1,室温 10,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中废液。
(注意:Buffer W1 按要求加入无水乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发)
7. 向吸附柱内加入 500 µl Buffer W2,室温 10,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中废液。
(注意:Buffer W2 按要求加入无水乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发)
8. 重复步骤 7 一次。
9. 室温 12,000 rpm 离心 2 min,甩干残留液体。
(注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响基因组 DNA 的后续使用)
10. 将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 塑料离心管(自备)中,加入 30 - 50 µl Buffer EB,
室温放置 2 min。10,000 rpm 离心 2 min,离心管底溶液即基因组 DNA。
(注意:为增加洗脱效率,可将洗脱液在 60℃预热。如需使用去离子水洗脱,可用 NaOH 调整其 pH
值在 7.0 - 8.5 之间,为了增加基因组 DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入到离心管中,室温放置
2 min,再次离心收集)
注意事项
●如 Buffer GTL 和 Buffer GL 产生沉淀,可在 56℃水浴溶解;
●样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA 片段小,提取量下降;
●所有离心步骤均为台式离心机,室温下操作;
●按要求在 Buffer W1/W2 中加入无水乙醇。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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