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精液基因组DNA提取试剂盒
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详细内容
精液基因组DNA提取试剂盒
S e m e n G e n o m i c D N A P u r i f i c a t i o n K i t
产品及特点:
本试剂盒适用于精液基因组 DNA 的提取。试剂盒采用了独特的细胞裂解体系降解蛋白,结合硅胶膜特异吸附核酸的原理,可快速纯化得到高质量的基因组 DNA。使用本试剂盒得到的基因组 DNA 无蛋白、核酸酶污染,可直接进行 PCR、酶切和杂交等相关分子生物学实验。它具有下列特点:
1. 简便快速,可快速获得高纯度的基因组 DNA;
2. 重复性好,产量高;
3. 完全去除污染物和抑制剂,便于下游应用。
产品货号:XY911001
产品规格:50T/530元、100T/950元、200T/1770元
成分规格:
保存条件
蛋白酶 K 于-20℃,其他组分室温(15 - 25℃),可保存 12 个月。 使用方法
自备试剂
DTT、无水乙醇、RNase A(可选)。
(注意:Buffer W1 和 Buffer W2 为浓缩液,按要求加入无水乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发)
1. 吸取 50-100ul 新鲜或冷冻精液,加入 200 ul Buffer GTL,再加入 1M DTT 30 ul,混匀。
2. 加入 20 ul Proteinase K 溶液,充分混匀,在 56℃放置,直至组织完全溶解。
3. 加入 200 ul Buffer GL,充分混匀,70℃水浴或金属浴处理 10 min,期间每隔一段时间震荡离心管,溶液变得清亮后短暂离心,以去除管盖内壁的水珠。
(注意:Buffer GL 加入时可能会产生白色沉淀,一般 70℃时会消失,不影响后续实验,如溶液未变清亮,说明细胞裂解不,可能导致提取的 DNA 量少或者提取的 DNA 不纯)
4. 加入 200 ul 无水乙醇,充分震荡,此时可能会出现絮状沉淀,短暂离心以去除管盖内壁水珠。
5. 将所得溶液和絮状沉淀转移到离心吸附柱中,12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中的滤液。
6. 向吸附柱内加入 500 ul Buffer W1,室温 12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中滤液。
(注意:Buffer W1 为浓缩液,按要求加入无水乙醇,用后应立即盖紧瓶盖,以防酒精挥发)
7. 向吸附柱内加入 600 ul Buffer W2,室温 12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中滤液。
(注意:Buffer W2 为浓缩液,按要求加入无水乙醇,用后应立即盖紧瓶盖,以防酒精挥发)
8. 向吸附柱内加入 500 ul Buffer W2,室温 12,000 rpm 离心 2min,弃收集管中滤液。
9. 将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 塑料离心管(自备)中,加入 50 - 100 ul Buffer EB,室温放置 2 min。10,000 rpm 离心 1 min,离心管底溶液即基因组 DNA。
(注意:为增加洗脱效率,可将洗脱液在 60℃预热。如需使用去离子水洗脱,可用 NaOH 调整其 pH值在 7.0 - 8.5 之间,为了增加基因组 DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入到离心管中,室温放置2 min,再次离心收集)
注意事项
●如 Buffer GTL 和 Buffer GL 产生沉淀,可在 56℃水浴溶解;
●样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA 片段小,提取量下降;
●所有离心步骤均为台式离心机,室温下操作;
●按要求在 Buffer W1/W2 中加入无水乙醇。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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