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游离DNA提取试剂盒
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详细内容
游离DNA提取试剂盒
C i r c u l a t i o n D N A P u r i f i c a t i o n K i t
( 离 心 柱 型 )
产品及特点:
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血浆、血清和无细胞体液中提取高质量的游离 DNA,也可以用于提取外泌体携带的DNA。独特的缓冲液/蛋白酶K体系能迅速裂解游离的DNA和蛋白复合物,降解蛋白,DNA 吸附于硅基质膜上,通过快速的漂洗、离心步骤,去除杂质,得到高纯度的游离 DNA。
本试剂盒操作简单、快速,所得游离 DNA 不含蛋白、核酸酶和其他杂质,可直接用于常规 PCR 和实时荧光定量 PCR 等分子生物学实验。它具有下列特点:
1. 简便快速:1 小时内可获得高纯度的游离 DNA;
2. 安全:无需有机溶剂抽提,使用安全;
3. 稳定:所得 DNA 纯度高,重复性好,方便下游应用。
产品货号:XY911501
产品规格:50T/950元、100T/1325元、200T/1770元
成分规格:
保存条件
蛋白酶 K 于-20℃,Buffer DT 于 4℃储存,其他试剂与物品储存于室温(15-25℃)。
使用方法
自备试剂
无水乙醇。
1. 向离心管(自备)中加入 20 ul Proteinase K。
2. 向离心管中加入 200 ul 血清、血浆或无细胞体液,再加入 200 ul Buffer GL 涡旋震荡充分混匀。
(注意:为确保样本有效裂解,加入 Buffer GL 后,需将样本与 Buffer GL 充分混匀。)
3. 56℃孵育 10 min,短暂离心,将管壁上的溶液收集到管底。
4. 加入 250 ul 无水乙醇,涡旋震荡 15 sec,室温放置 5 min,短暂离心,将管壁上的溶
液收集到管底。
(注意:如果环境温度超过 25℃,无水乙醇应在冰上预冷后使用。)
5. 将一个吸附柱放入收集管中,将上一步所得溶液转移到离心吸附柱中,10,000 rpm 离
心 1 min,弃收集管中的废液。
6. 向吸附柱内加入 500 ul 的 Buffer W1,室温 10,000 rpm 离心 1 min,弃收集管中废液。
(注意:Buffer W1 中含有乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发)
7. 向吸附柱内加入 500 ul 的 Buffer W2,室温 10,000 rpm 离心 1 min,弃收集管中废液。
(注意: Buffer W2 按要求加入无水乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发;如需进一步提高 DNA 纯
度,可重复步骤 7 一次。)
8. 室温 12,000 rpm 离心 3 min,甩干残留液体。
(注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响后续使用)
9. 将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 塑料离心管(自备)中,小心打开吸附柱的盖子,
室温放置 2 min,使吸附膜完全变干。加入 20 ~ 50 ul 的洗脱液 Buffer EB,室温放置
2 min。10,000 rpm 离心 2 min,离心管底溶液即游离 DNA。
(注意:为增加洗脱效率,可将洗脱液在 60℃预热。如需使用去离子水洗脱,可用 NaOH 调整其 pH
值在 7.0 ~ 8.5 之间,为了增加 DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入到离心管中,室温放置 2 min,
再次离心收集)
注意事项
●实验前在 Buffer W1 和 Buffer W2 中按标签说明加入无水乙醇;
●如缓冲液 Buffer GL、Buffer W1 结晶或产生沉淀,可在 56℃水浴溶解;
●所有离心步骤均为室温下操作。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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