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M-MLV 反转录酶
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详细内容
M-MLV 反转录酶
M-M LV Re v e r s e Tr a n s c r i p t a s e
产品及特点:
本产品采用大肠杆菌表达体系,是经过高度纯化的重组酶。该酶的 RNA 酶 H 活性很低,具有更高的热稳定性,广泛应用于链 cDNA 的合成,反转录温度高达 55°C,特异性和 cDNA 产量明显提高,长度明显大于、第二代反转录酶。本产品适合于从各种组织中提取的总 RNA 或 mRNA 为模板合成 cDNA 链、实时荧光定量 RT-PCR、3’-和 5’-RACE 等。它具有下列特点:
1. 逆转录效率高,链 cDNA 产量高;
2. 最长可合成 5 kb 的 cDNA 片段;
3. 逆转录反应的模板总 RNA 范围可以在 10 ng-5 µg 之间。
产品货号:XY920301
产品规格:10000 U/450元、100000 U/3250元
成分规格:
保存条件
-20℃,有效期 24 个月。
使用方法
(注意:总反应体积为20 µl,总RNA的量为10 ng - 5 µg,若起始RNA的量小于50 ng,则建议加
入RNA酶抑制剂RNasin)
1. 将 5 × RT Buffer 和 M-MLV 反转录酶溶解并置于冰上备用,准备好 RNA 模板、引物
(oligo dT,随机引物,或者二者的 Primer Mix、或者特异性引物),dNTP Mix、DEPCddH2O 等。
2. 在无 RNase 的 PCR 管中加入引物,总 RNA (10 ng - 5 µg)或 mRNA(1 - 500 ng),4 µl
dNTP (2.5 mM each),4 µl 5 × RT Buffer,1 µl M-MLV 反转录酶,补足 DEPC-ddH2O 至
20 µl。
3. 振荡混匀,离心数秒使反应液聚集于 PCR 管底部。
4. 42℃保温 15-60 min。85℃孵育 5min,反应结束后,短暂离心,置于冰上冷却。
5. 该产物可直接用于第二链的合成或 RT- PCR 扩增反应,保存请置于-20℃。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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