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蛋白浓度测定试剂盒(BCA法)
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详细内容
蛋白浓度测定试剂盒(BCA法)
产品及特点:
BCA 蛋白浓度测定试剂盒是基于双辛可宁酸(BCA bicinchoninic acid)的去污剂竞争
的配方,用于显色测定和总蛋白定量,是最常用蛋白含量检测方法。
检测原理是碱性条件下蛋白将Cu2+还原为Cu1+(双缩脲反应),一个Cu1+与二个 BCA
分子螯合后产生紫色水溶性反应产物,在 562 nm 波长具有强烈的吸收,与 20-2000 µg/mL
范围的蛋白浓度呈近线性关系,检测下限达到 25µg/mL,最小检测蛋白量达到 0.5 µg,待
测样品体积为 1-20 µL,可实现蛋白浓度测定的高灵敏度和高特异性。
BCA 法具有高兼容性,即抗干扰能力,可以兼容样品中高达 5%的 SDS,5%的 Triton
X-100,5%的 Tween 20、60、80。本品易受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保
EDTA 低于 10mM,无 EGTA,二硫苏糖醇(DTT)低于 1 mM,β-巯基乙醇低于 0.01%。不
适用 BCA 法时建议使用 Bradford 蛋白定量法。
产品货号:XY940501
产品规格:250T/398元
成分规格:
规格说明:酶标板 250 次,比色皿 50 次;
特说明: BCA 法 A 液和 BCA 法 B 液可室温放置,A 液属于饱和溶液,低温会有沉淀析出,属
于正常现象,温水浴或室温条件下,溶解混匀即可。
保存及运输
常温运输,2-8℃保存,保存期限为 12 个月。
使用方法
酶标板测定法标准曲线绘制
1. 取一块酶标板,按照下表加入试剂:


2. 根据样品数量,按 50 体积的 BCA 法 A 液加 1 体积的 BCA 法 B 液(50:1)配制成 BCA
工作液,充分混匀。
3. 各孔加入 200 µl BCA 工作液。
4. 盖上酶标板,置振荡器上振荡 30s,移至 37℃温箱,孵育 30min。
5. 冷却至室温,上酶标仪,测定 562nm 波长的吸光值(540-590nm 均可测定)。
6. 以蛋白浓度为横坐标,吸光值为纵坐标,绘出标准曲线。
样品测定
7. 稀释待测样品至合适浓度,使样品稀释液总体积为 20 µl,加入 BCA 工作液 200 µl,
充分混匀,37℃放置 30min 后,以标准曲线 0 号孔做参比,在 562nm 波长下比色,记
录吸光值。
8. 根据所测样品的吸光值,在标准曲线上即可查得相应的蛋白浓度。
注意事项
●配制好的混合 BCA 工作液室温 24h 内稳定
●加入 BCA 工作液后,也可以在室温放置 2h。BCA 法测定蛋白浓度时,吸光度会随着
时间的延长不断加深,且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高
温度孵育(如 60℃放置 30min)。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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