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293MaxFect Transfection Reagent
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详细内容
293MaxFect Transfection Reagent
产品及特点:
293MaxFect 转染试剂是基于可生物降解聚合物技术的转染试剂,能够与 DNA 形成复合物,并将复合物运送到各种贴壁细胞和悬浮细胞系中。该试剂的显著特点是转染复合物胞吞后,聚合物能够快速并完全降解,从而降低细胞毒性。本产品具有以下特点:
1. 对悬浮和贴壁 293 细胞都有很高的转染效率。
2. 高蛋白或抗体表达水平。
3. 对细胞作用温和,毒性很低。
产品货号:XY90010
产品规格:1ml/3050元
成分规格:
保存条件
4℃储存(切勿冷冻),有效期两年。
使用方法
以转染悬浮 293 细胞表达蛋白为例。
1.1 细胞接种:
在细胞接种当天,调整细胞密度,使其达到指数生长期,转染时活细胞密度(VCD)约为 2-2.5 × 106个细胞/ml。
根据使用的细胞培养容器调整细胞接种数目:
摇瓶:为确保细胞在 24 小时后达到最佳 VCD,建议起始接种量为 1 ×106个细胞/ml。
其他(如细胞培养袋或生物反应器):当细胞生长达到 VCD 即 2-2.5 ×106个细胞/ml当天,可进行转染实验。
1.2 制备转染复合物:
以下实验步骤以悬浮 293 细胞为例,转染目标 DNA 从而获得最佳蛋白表达量。转染复合物配制请参考下表:

1.3 转染:
以下实验步骤为在 30ml 细胞培养基中转染悬浮 293 细胞。如果您希望转染更大体积的悬浮细胞,可根据培养体积比例扩大转染规模。
1. 在转染当天,测量细胞密度并根据 1.2 的表格确定转染参数(每百万个细胞需要的 DNA量和 293MaxFect 转染试剂用量)。比如细胞 VCD 为 2 ×106个细胞/ml。
2. 在 1.5ml 无血清 DMEM 培养基中加入 60µg DNA,轻轻混匀。
3. 使用前,轻轻晃动混匀 293MaxFect 转染试剂。在 1.5ml 无血清 DMEM 培养基中加入120µl 293MaxFect 转染试剂。轻轻混匀。
4. 立即将 1.5ml 293MaxFect 稀释液加到 1.5ml DNA 稀释液中,短暂涡旋震荡或上下颠倒混匀。
5. 将转染复合物室温孵育 15min。
6. 吸取上述 293MaxFect/DNA 转染复合物 3ml,加入细胞中。轻轻晃动培养瓶,混匀。
7. 在合适的培养条件(如 37°C、转速 125 rpm、8%CO2)下培养细胞,根据实验需要适时收细胞,提取蛋白。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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