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细胞溶酶体膜通透性/完整性荧光检测试剂盒

价格：￥ 50T/1080元；100T/1900元

品牌名称：$brandModel.Title型号：原产地：中国大陆更新时间：2026/10/15 11:06:33

产品摘要：细胞溶酶体膜通透性/完整性荧光检测试剂盒是利用荧光染料吖啶橙的溶酶体吸收和细胞内再分布方法进行检测。

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细胞溶酶体膜通透性/完整性荧光检测试剂盒

产品货号：XY9-48142

产品规格及价格：50T/1080元；100T/1900元

产品简介：

细胞溶酶体膜通透性（LMP）/完整性检测试剂盒是利用荧光染料吖啶橙的溶酶体吸收和细胞内再分布方法进行检测。
细胞膜通透性荧光染料选择性地聚集在溶酶体内呈现荧光染色，经过处理的细胞的溶酶体通透性增加后，荧光染料由溶酶体释放到细胞浆中，可以通过荧光染料的不同荧光强度变化，来分析和观察溶酶体膜通透性变化的经典的技术方法。该方法适用于各种活体细胞溶酶体（动物、人体、昆虫等）膜通透性的检测。
溶酶体（lysosome）是一种动态性的、多态性的、含有水解酶的细胞器，具有接受和降解来自于分泌性、内吞性（endocytic）、自噬性（autophagic）、吞噬性（phagocytic）膜运转通路中的大分子。其功能是膜依赖性，具有解毒和防御作用。溶酶体在细胞凋亡调节中的研究越来越受到重视，溶酶体膜通透性（LMP）改变可以启动溶酶体凋亡途径，LMP改变可能被证明是一种有价值的治疗方法，可以作为细胞死亡的触发器，也可以作为治疗药物释放参与细胞凋亡的指标之一。
溶酶体膜是溶酶体内基质和胞浆之间的生理屏障，为整合性糖蛋白，防止细胞自我降解。一旦溶酶体膜去稳定（destabilization），例如碱性化或内容物移位（translocation），将导致质子和水解酶外漏，而造成细胞器功能异常，进而产生细胞坏死、凋亡，以及病理症状，例如朊病毒脑病（prion encephalopathies）、阿茨罕默病、心肌缺血、脊髓灰质炎病毒感染、补体激活型肺损伤（complement activation-produced lung injury）、急性组织损伤等疾病。其中膜通透性增加，是溶酶体膜去稳定性或去完整性的标志之一，溶酶体内容物大量释放到胞浆中，直接影响细胞的存活。
吖啶橙（acridine orange；AO）是一种亲溶酶体（lysomotropic）异染性（ｍmbedchromatic）的荧光染料，在完整的溶酶体内，为质子化（protonated）寡聚体（oligomeric）形式，呈现红色荧光（激发波长555 nm，发射波长616 nm），而在胞浆内，为单体去质子化形式，呈现绿色荧光（激发波长490 nm，发射波长526 nm）。吖啶橙进入溶酶体后重新分布，即吸收和细胞内再分布（uptakeand redistribution），用于分析溶酶体膜通透性状况。
可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

产品应用：

荧光酶标仪/荧光光度计/流式细胞仪

通用.jpg

使用方法：

1. 预实验很重要。必须要做预实验，在正式实验之前取少量样本优化实验条件，并像正式样本一样认真进行，看实验结果是否可行，实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性，不同样本的实验条件通常差异较大，同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同，为了避免浪费正式样本和试剂，一定要提前预实验优化实验条件。

2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使溶液集中于管底。

3. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

4. 标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。

5. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

6. 染色后立即进行分析。

7. 本试剂盒主要用于细胞内溶酶体膜通透性变化的定性检测。

8. 必须使用荧光检测专用黑色 96 孔板。

1. 染色工作液的配制：

根据样品数，用染料稀释液将 AO 染料进行 10 倍稀释，然后再用 PBS 或 HBSS 缓冲液将以上 AO 稀释液进行 20 倍稀释，配制成 AO 染色工作液。

2. 制备好的的细胞模型移除培养基，用 PBS 洗一次。

3. 将 AO 染色工作液加入已处理好的细胞，在 37℃孵育 15-60 分钟。

4. 用冷的洗涤液洗涤细胞 2-3 次。

5. 然后用该细胞进行荧光细胞溶酶体膜通透性变化情况检测。

激发波长 555 nm，发射波长 616 nm，检测红色荧光强度。

【注】：

荧光强度减弱，溶酶体膜通透性增加。

使用荧光酶标仪、荧光光度计、流式等设备测定。没有条件也可以拍照分析，需要使用相应的荧光强度分析软件。

常见问题分析：

1.结果如何分析？

溶酶体膜通透性变化只能通过设置参照样本，以参照样本来反映目标样本相对变化，这个“相对”是针对参照的。分析结果是定性的，也是没有单位的，因为它本质上是一个比值（目标/参照）。反映的是模型样本通过具体的干预措施（如养分缺失、缺氧、药物治疗或遗传基因操控等）如何影响其 LMP 的变化，测定其 LMP 增加的程度。

2.荧光照片如何分析？

需要有相关的荧光强度分析软件。不能用眼睛看荧光强度的差异。

如果所使用的高内涵、共聚焦等设备本身带有相关的分析软件，就用设备的软件即可；如果设备没有相关的荧光强度分析功能，可以将设备拍摄的荧光照片用 ImageJ 等软件进行荧光强度分析。

有的显微镜扫描下来的图像本身就可以测面积和强度，可以同时测不同颜色的荧光强度。有的显微镜不支持此功能，可以将荧光染色彩色图像转换为黑白的灰度图，然后再以灰度值作为测量指标进行分析。

要结合明场的照片具体分析。如果细胞分布均匀可以算固定面积荧光强度。成像时中心和四周有差异时，一般将四周剪切掉也可以。如果细胞分布不匀，需要找到细胞分布匀称的视野，一个视野一个视野找。

如果要用图片做结果，就要平行做多个图片，作分析，统计，每张都要求荧光分布尽量一致。

为了去除杂光的影响，可以适当调节统计荧光的强度范围，将信号过弱的背景杂光去除掉。

对照组和实验组整张图片需要做同样的处理，保证所有参数均要一致。

对于不同情况荧光强度的统计方法，根据实验需要或参考文献。可以算等面积的平均强度；也可以算阈值高于一定值的平均强度；也可以算荧光的累积而不算平均。要根据课题需要选择合适的测量统计方法。

3.荧光照片效果不好？

荧光拍照存在很多变量，每一个变量都会严重影响拍照效果。

荧光拍摄条件：拍摄环境、显微镜品牌和激发荧光决定了镜下观察的效果。同样的操作方法和样本，在不同品牌显微镜下显示出完全不同的荧光强度。

荧光衰减：荧光物质的衰减通常都是非常明显的。同样的一组细胞样本，1 小时内拍摄和 8小时后拍摄，荧光效果完全不同。

用高内涵、激光共聚焦显微镜等设备，激光共聚焦显微镜的分辨率比普通荧光显微镜要高的多，通常同一样本激光共聚焦的更优。

仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。

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