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Ca2+钙离子染色试剂盒- F04,绿色荧光
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详细内容
Ca2+钙离子染色试剂盒- F04,绿色荧光
产品货号:XY9-44128
产品规格及价格:50T/1000元;100T/1700元
产品简介:
F04细胞内钙离子染色试剂盒是利用F系列Ca2+钙离子荧光探针进行钙离子特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的 F04细胞内钙离子染色探针为绿色荧光标记的钙离子探针,具有505 / 525nm的最大激发/发射波长。
F04具有极高的细胞渗透性,经过简单孵育即可实现细胞加载。穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成不易透过细胞膜的F04新产物,从而被滞留在细胞内。F04游离配体几乎是非荧光性的,其荧光不会随钙离子浓度升高而增强。但是,当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光,荧光会增加60至100倍,被激发后可以发出绿色的荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命。最大激发波长为 505nm,最大发射波长为 525nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右,发射波长为 515~530nm。可以使用荧光显微镜、酶标仪、激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。
F04荧光探针采用可见光激发,与传统的紫外光激发的荧光探针相比,仪器的适用范围更广泛,具有更强的探针吸收性能,使得更低浓度的探针即可成功检测Ca2+变化,从而降低了对活细胞的光毒性,检测敏感度更高。
F系列钙离子探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针还可以提供橙色等其他颜色的染色试剂盒。
可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
以96孔板每孔200ul染色液计,本试剂盒小包装可以染色50-500个样本。
产品应用:
流式细胞仪/荧光显微镜/激光共聚焦

使用方法:
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.F04 染色液为 DMSO 溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使 DMSO 溶液集中于管底。
4.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
5.标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。
6.染色后立即进行分析。
7.本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。
8.可以在染色溶液中加入等体积的 20% Pluronic F127 溶液,Pluronic F127 可以帮助 F04 探针更快进入细胞,不建议在 Pluronic F127 中长期保存 F04 探针。
9.由于 F04 探针在水中的稳定性比较差,染色工作液必须现配现用,并且在当天用完。
10.F04 探针对湿度比较敏感,每次取完需要量后,必须紧紧密封盖子。建议根据单次用量,分装密封保存。不可使用含水的吸头。
11.试剂 A 母液请拧紧螺旋盖,避免受潮失效。
1. 染色工作液的配制:
根据样本数量,用 37℃培养箱预热的 HBSS 将 F04 荧光染料 200-1000 倍稀释,配制成染色工作液。
2. 细胞染色
悬浮细胞染色
1) 用 PBS 洗涤细胞 2 次。
2) 加入适量体积的染色工作液重悬细胞,使其密度大约为 1×106/mL。
3) 在 37 ℃孵育细胞 20 分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。可以用 20 分钟作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 加入 5 倍体积的含有 1%胎牛血清的 HBSS,再继续孵育 40 分钟。
5) 孵育结束,500 g 离心 5 分钟。
6) 弃上清液,再次缓慢加入 37℃预热的 HBSS 重悬细胞。
7) 重复(5),(6)步骤两次。
8) 加入 HBSS 重悬细胞,在 37℃下再继续孵育 20 分钟。
9) 然后用该细胞进行荧光钙离子检测。
贴壁细胞染色
1) 用 PBS 洗涤细胞 2 次。
2) 细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。
3) 37 ℃孵育细胞 20 分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。可以用 20 分钟作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 吸干染色工作液,用 HBSS 洗培养板或盖玻片 2~3 次,每次用预热的 HBSS 覆盖所有细胞,然后吸干培养基。
5) 加入 HBSS,在 37℃下再继续孵育 20 分钟。
6) 然后用该细胞进行荧光钙离子检测。
3. 用荧光显微镜或流式细胞仪检测
激发波长为 488nm,最大发射波长为 525nm。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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