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线粒体膜流动性（fluidity）TMA-DPH荧光检测试剂盒
价格：￥ 100T/3000元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:06:33
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详细内容
线粒体膜流动性（fluidity）TMA-DPH荧光检测试剂盒
产品货号：XY9-48119
产品规格及价格：100T/3000元
产品简介：
膜的流动性是生物膜结构的基本特征之一，主要指膜脂肪酸链部分及膜蛋白的运动状态。膜脂类分子在相变温度以上条件下主要有侧向扩散、旋转、左右摇摆、伸缩振荡、翻转及异化运动等方式。膜蛋白的运动方式大体分为侧向及旋转运动，主要受脂质双分子层的影响。脂肪酸不饱和键含量和链的长度明显影响着膜脂流动性，不饱和键的存在会降低膜脂分子间排列的有序性，从而增加膜的流动性，短链能减低脂肪酸链尾部相互作用，在相变温度下，不易于凝集，此外，脂肪酸烃链围绕C- C键由全反式构型到歪扭(CAUCHE)的旋转异构运动，也可使流动性加大。
生物膜适宜的流动性是体现生物膜正常功能的必要条件，在一定范围内，膜流动性增加，有利于膜中酶分子的扩散和旋转运动，使酶活性增加。一些载体蛋白分子的运动性也取决于膜中脂类分子的流动性。研究发现肿瘤对化疗药物产生的耐药性主要与细胞膜P糖蛋白过度表达谷胱甘肽及其相关酶系活性改变有关，也有许多研究表明耐药细胞膜流动性较亲代敏感细胞明显增加。另有实验研究发现腹水癌细胞的恶性程度随着膜流动性的增加而增加，白血病及转移的肿瘤细胞的膜流动性远远高于非转移细胞。因此，对敏感及耐药的肿瘤细胞膜流动性的监测有着重要的意义。
膜流动性的测定方法主要有荧光探针标记，电子自旋共振以及差示扫描量热法，x线衍射，棱碰共振等。
TMA-DPH线粒体膜流动性检测试剂盒是利用TMA-DPH测定线粒体膜流动性的荧光探针法，它在脂蛋白及其类似系统的单分子层动力学研究中特别有用。TMA-DPH呈圆柱形，会发生基于按长分子轴线平行排列而产生发射荧光向偶极跃迁，它们对由于周围脂类相互作用而导致的再定位非常敏感。它们广泛地被用于旋转运动研究中的荧光偏振分析。
TMA-DPH本身不发荧光，当与线粒体膜结合后，荧光大大增强，TMA-DPH与可用的线粒体膜表面成比例，其荧光强度对膜表面积的增加敏感。因此，其荧光强度对于导致膜表面积净变化的生理过程敏感，使其成为用于监测诸如线粒体体积和膜变化的事件的探针。TMA-DPH荧光偏振测量可与视频显微镜组合，以在大脂质体和单线粒体中提供磷脂顺序的空间分辨图像。
TMA-DPH探针的最大激发波长为355 nm，最大发射波长为430 nm。
产品应用：
可检测偏振光的荧光分光光度计/ 酶标仪
使用方法：
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2.染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3. 线粒体处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤线粒体膜。
4. 染色后立即进行分析。
5.标记的条件因线粒体种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先确定最佳条件。
6.注意线粒体制备的质量。
7.探针的信号变化直接取决于所测量细胞类型的线粒体，建议尽可能使用每孔高的线粒体密度作为起点，并根据需要减少线粒体数量。
8.可以用蛋白定量检测线粒体数量，通常1克动物组织或5 X 107细胞的线粒体含量为50ug以上线粒体蛋白。
9. 如果需要定量线粒体，稀释后数分钟内完成，否则线粒体将分解。
10. 尽可能采用高纯度的线粒体样本。
11.使用荧光培养专用的透明底黑色培养板。实在没有的话可以采用透明板，注意孔间隔开，减少检测时各孔之间的光互相干扰。
12. 以下步骤仅供参考。请根据实际实验方案设计或者参考文献实验。
1. 染色工作液的配制：
用稀释液稀释 TMA-DPH 探针 1000 倍，配制成 TMA-DPH 染色工作液。
【注】：
也可以不用试剂盒中的稀释液，直接用 HBSS 或 PBS 稀释即可。
使用前做预实验在推荐浓度范围内测试选定最佳浓度。
推荐该探针加载浓度在 1000-5000 倍稀释，具体的使用浓度需根据实验要求进行优化。
2. 用染色工作液重悬待测线粒体样本，在 37℃孵育 15-45 分钟。
【注】：
一般每样为大于 200 mg 动物组织或 1 X 107 细胞的线粒体。
线粒体的提取操作对检测很重要，尽量减少对线粒体的损伤。
3. 用 pH7.4 HBSS 或 20 mM HEPES 或 PBS 洗涤线粒体 1 次。
4. 用 pH7.4 HBSS 或 20 mM HEPES 或 PBS 重悬线粒体
5. 用该线粒体样本进行检测。
激发波长 355 nm，发射波长 430 nm。
【注】：
荧光检测需要使用荧光专用的透明底黑色培养板。
按下列公式计算荧光偏振度 P：
P=（IVV-GIVH）/(IVV+GIVH)
P 值越大 ,流动性越小；P 值越小，流动性越大。
其中校正因子 G=IHV/IHH
式中
IVV：起偏和检偏器光轴同为垂直方向时测得的荧光强度（I0°,0°）、（I∥）；
（激发光为垂直方向的偏振光，发射光为垂直方向的偏振光时测得的荧光强度）
IVH：起偏和检偏器光轴分别为垂直和水平方向时测得的荧光强度（I0°, 90°）、（I⊥）；
IHV：起偏和检偏器光轴分别为水平和垂直方向时测得的荧光强度（I90°, 0°）；
IHH：起偏和检偏器光轴同为水平方向时测得的荧光强度（I90°, 90°）。
微粘度 η=2P/（0.46-P）
P 值越大 , η 越高，膜流动性越小；P 值越小，η 越低，膜流动性越大。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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