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组织外泌体提取试剂盒-超纯
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详细内容
组织外泌体提取试剂盒-超纯
产品货号:XY9-390473
产品规格及价格:20T/3200元;50T/5300元
原理
分子排阻色谱法:利用外泌体与其他杂质分子大小不同,通过装填有多孔凝胶颗粒的纯化柱。外泌体尺寸较大,不能进入凝胶颗粒内部,随流动相快速通过柱子;而较小的杂质分子则进入凝胶颗粒孔道,在内部迂回,从而实现外泌体与杂质的分离。
沉淀法:通过添加特定的试剂,如 Exosome Precipitation Solution,使样品中的外泌体迅速聚集沉降,再通过离心收集沉淀中的外泌体。

操作步骤
样品预处理:将组织剪切成 1mm³-3mm³ 左右的碎组织块,加入不少于 10 倍体积的 1×PBS 缓冲液,振荡混匀后 300×g 离心 10min,弃上清。
组织消化:按每 0.1g 组织块加入 1mL Solution A2 的比例,将组织块与 Solution A2 混匀,在 37℃、80rpm 恒温摇床上孵育 20min 或在 37℃水浴锅中孵育 30min,每 5min 混匀一次。
离心取上清:反应液以 8,000×g 离心 10min,将上清液转移至新的离心管中。
离心去杂质碎片:将离心上清液于 4℃以 12,000×g 离心 10min,去除杂质碎片,将上清液转移到新离心管中。
加 Solution B2 试剂:在上一步获得的上清液中加入 1/4 体积的 Solution B2 试剂,盖紧离心管盖,通过涡旋振荡器混匀 1min,再放置于 4℃静置 1h 以上。
沉淀外泌体:取出装有混合液的离心管于 4℃以 12,000×g 离心 30min,弃上清,沉淀中富含外泌体颗粒。
再次离心:将含有沉淀的离心管再次于 4℃以 12,000×g 离心 2min,弃上清。
外泌体重悬:取合适量的 1×PBS 均匀吹打离心沉淀物,待其溶解后,将重悬液转移至新的 1.5mL 离心管中。
收获外泌体颗粒:将含有重悬液的 1.5mL 离心管于 4℃以 12,000×g 离心 2min,保留上清液,其中富含外泌体颗粒。
纯化外泌体:将收获的外泌体颗粒粗品转入 Exosome Purification Filter 上室中,于 4℃以 3,000×g 离心 10min,离心后收集柱底的液体,即为纯化后的外泌体颗粒。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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