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植物丙酮酸激酶(PK)检测试剂盒
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详细内容
植物丙酮酸激酶(PK)检测试剂盒
产品货号:XY9-51081
产品规格及价格:50T/1600元
产品简介:
植物丙酮酸激酶(PK)检测试剂盒是一种用于测定植物相关样本中丙酮酸激酶活性的工具,以下从原理、种类、使用方法等方面为你介绍:
检测原理
酶偶联法:丙酮酸激酶(PK)催化磷酸烯醇式丙酮酸和 ADP 生成 ATP 和丙酮酸,乳酸脱氢酶进一步催化 NADH 和丙酮酸生成乳酸和 NAD+,NADH 在 340nm 有特征吸收峰,而 NAD + 没有,通过测定 340nm 光吸收下降速率,即可反映 PK 活性。
酶联免疫法:应用双抗体夹心法测定标本中植物丙酮酸激酶(PK)水平。用纯化的植物丙酮酸激酶(PK)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入植物丙酮酸激酶(PK),再与 HRP 标记的检测抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物 TMB 显色,颜色的深浅和样品中的植物丙酮酸激酶(PK)呈正相关,用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中植物丙酮酸激酶(PK)活性浓度。

使用方法:
样本制备
组织样本:称取约 0.1g 植物组织,加入 1mL 提取液,冰浴匀浆,8000g,4℃离心 10min,取上清液,置冰上待测。
细胞样本:收集 500 万细胞到离心管内,用冷 PBS 清洗细胞,离心后弃上清,加入 1mL 提取液,冰浴超声波破碎细胞 5min(功率 20% 或 200W,超声 3s,间隔 7s,重复 30 次),然后 8000g,4℃离心 10min,取上清液,置冰上待测。
试剂准备:按照试剂盒说明书的要求,对各试剂进行解冻、稀释、配制等操作。例如,某些试剂需要用特定的溶液溶解,并在规定的温度下保存备用。
加样与测定:将制备好的样本与相应试剂加入到 96 孔 UV 板或微量石英比色皿中,迅速混匀,按照说明书的要求在酶标仪或紫外分光光度计上测定特定时间点的吸光值。
注意事项
试剂盒应在规定的温度下保存,避免反复冻融,使用前应平衡至室温。
样本制备过程中要注意保持低温,防止酶失活,尽量使用新鲜样本,如需保存,应在 - 80℃保存,并在 1 个月内完成检测。
实验过程中要严格按照说明书的操作步骤进行,准确加样、计时和测定吸光值。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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