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pMMB277
价格：￥ 990
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/22 8:32:13
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详细内容
pMMB277
中文名称：pMMB277
产品规格：2ug
产品货号：XY92768VT
运输：常温
保存：-20°C
有效期：两年
货期：一周
其他：多克隆位点经测序验证
类型：属于大肠杆菌表达载体，可用于在大肠杆菌中表达目的基因。
复制子：通常含有能在大肠杆菌中进行自我复制的复制起始位点，保证载体在宿主细胞内的大量复制。
结构特点
启动子：含有 tac 启动子，它是一种强启动子，由 trp 启动子的 - 35 区和 lacUV5 启动子的 - 10 区融合而成，能高效启动下游基因的转录，可被 IPTG（异丙基 -β-D - 硫代半乳糖苷）诱导，便于对目的基因的表达进行调控。
多克隆位点：具有多个限制性内切酶识别位点，便于目的基因的插入，这些位点的存在使得该载体可以方便地与不同的目的基因进行连接重组。
标记基因：一般会携带氨苄青霉素抗性基因（ampr）等筛选标记，用于转化后筛选含有该载体的宿主细胞，只有成功导入了带有抗性基因载体的大肠杆菌才能在含有氨苄青霉素的培养基上生长。
应用领域
基因表达：常用于基因工程中目的基因的表达，可使目的基因在大肠杆菌中大量表达，生产具有生物活性的蛋白质产物，如重组蛋白药物、酶制剂等。
基因克隆：作为基因克隆的载体，可将目的基因片段克隆到载体上，然后在大肠杆菌中进行扩增，为后续的基因分析、功能研究等提供大量的基因片段。
构建基因文库：可用于构建基因组文库或 cDNA 文库，将生物基因组 DNA 或 cDNA 片段插入到 pMMB277 载体中，转化大肠杆菌后形成基因文库，便于筛选和研究特定的基因。
使用方法
载体准备：通过限制性内切酶酶切 pMMB277 载体，使其在多克隆位点处产生粘性末端或平末端，以便与目的基因进行连接。
目的基因获取：采用 PCR 扩增、酶切等方法从基因组 DNA 或 cDNA 中获取目的基因片段，并使目的基因两端产生与载体酶切后相匹配的末端。
连接反应：使用 DNA 连接酶将目的基因片段与酶切后的 pMMB277 载体进行连接，形成重组载体。
转化宿主细胞：将重组载体转化到大肠杆菌感受态细胞中，如 DH5α、BL21 等菌株，使大肠杆菌细胞摄取重组载体。
筛选与鉴定：将转化后的大肠杆菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，筛选出含有重组载体的阳性克隆。然后通过菌落 PCR、酶切鉴定、测序等方法进一步验证重组载体中目的基因的插入情况和序列正确性。
诱导表达：对于需要表达目的蛋白的情况，在含有重组载体的大肠杆菌培养到一定阶段后，加入 IPTG 进行诱导，使 tac 启动子启动目的基因的表达，进而在大肠杆菌细胞内合成目的蛋白。
注意事项：该产品仅供科研使用，不得用于临床诊断及其他用途，产品说明书以到货说明书为准，网站说明书仅供参考！
热门标签：pMMB277,pMMB277载体,,,,pMMB277质粒
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