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pET-32a(+)载体
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详细内容
pET-32a(+)载体
产品规格:2ug
产品货号:XY91393VT
基本信息
| 质粒类型: | 大肠杆菌表达载体 |
|---|---|
| 表达水平: | 高 |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 5900 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物: | T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
| 3' 测序引物: | T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' |
| 载体标签: | thioredoxin (N端); His (中间和C端) |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 备注: | pET32a载体用于表达可溶性,具有活性功能的蛋白;pET-32a(+)载体具有N端Thrombin(凝血酶)酶切位点,N端肠激酶酶切位点。pET32啊,pET32b,pET32c载体的差异主要是在于多克隆位点,其他地方完全一致。 |
质粒图谱


结构特点
T7 表达系统元件:含有 T7 启动子(T7 promoter)和 T7 终止子(T7 terminator),T7 启动子可被 T7 RNA 聚合酶特异性识别并启动转录,能高效驱动目的基因的表达。
融合标签序列:在 N 端含有 TrxA(Trx-tag,硫氧还蛋白标签),有利于提高蛋白的可溶性表达;还包含 His-Tag、Thrombin(凝血酶)酶切位点、S-Tag、Enterokinase(肠激酶)酶切位点,C 端也有 His-Tag,便于对表达的融合蛋白进行检测、纯化和后续处理。
多克隆位点:具有多个限制性内切酶识别位点,如 EcoRⅠ、XhoⅠ 等,方便目的基因的插入。
其他元件:包含 f1 ori,可用于产生单链 DNA;还有 AmpR promoter 和 AmpR 基因,赋予载体氨苄青霉素抗性;以及 lacI 和 lacI promoter 等与乳糖操纵子相关的元件,可用于调控基因表达。
作用及应用
蛋白表达:常用于在大肠杆菌等原核生物中表达外源蛋白,可使目的蛋白以融合蛋白的形式表达,提高蛋白的表达量和可溶性,有助于获得大量有活性的蛋白,为蛋白结构与功能研究、抗体生产等提供材料。
蛋白纯化:利用载体上的 His-Tag 等标签,可通过镍柱亲和层析等方法方便地对表达的蛋白进行纯化,获得高纯度的目的蛋白。
蛋白检测:S-Tag 等标签可用于蛋白的检测,如通过相应的抗体进行 Western blot 等实验,检测蛋白的表达情况。
基因克隆:多克隆位点的存在使得目的基因的克隆更加方便,可将不同来源的基因片段插入载体中,构建重组质粒。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
热门标签:pET-32a(+)载体,pET-32a(+)质粒,pET-32a(+)















