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上海信裕生物科技有限公司 主营产品:ELISA试剂盒价格,检测试剂盒,白介素试剂盒,试剂盒价格,重组蛋白,单克隆抗体,多克隆抗体

第11年

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pET-His载体

价格:¥ 1080

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/22 8:32:06

产品摘要:pET-His载体在 N 端或 C 端含有 His 标签编码序列,通常是 6 个组氨酸(6×His)串联组成,如 pET-N-His-TEV 是 N 端含有 His 标签,pET-N-His-C-His 则在 N 端和 C 端都有 His 标签。

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产品完善度: 访问次数:601

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旗舰版网址:http://www.xybio-sh.com

详细内容

pET-His载体

产品规格:2ug

产品货号:XY91475VT

基本信息

质粒类型:大肠杆菌表达载体
启动子:T7
载体标签:,N-HIS
酶识别位点:Thrombin
载体抗性:Ampicillin
5' 测序引物及序列:T7:5 TAA TAC GAC TCA CTA TAG GG 3
3' 测序引物及序列:T7-t: 5 GCT AGT TAT TGC TCA GCG G 3

质粒图谱

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结构特点

His 标签:在 N 端或 C 端含有 His 标签编码序列,通常是 6 个组氨酸(6×His)串联组成,如 pET-N-His-TEV 是 N 端含有 His 标签,pET-N-His-C-His 则在 N 端和 C 端都有 His 标签。His 标签可以与镍离子等金属离子特异性结合,利用镍 - 螯合柱进行亲和层析,方便对表达的融合蛋白进行纯化,即使在变性条件下也能有效纯化。

酶切位点:具有多种限制性内切酶识别位点,如 NdeI、BamHI、XhoI 等,位于多克隆位点区域,便于目的基因的插入。一些载体还含有特定的蛋白酶切位点,如 pET-N-His-TEV 的 N 端 His 标签后含有 TEV 酶切位点,pET-N-His-Thrombin-C-His 的 N 端 His 标签后有 Thrombin 酶切位点,可在目的蛋白纯化后用于切除 His 标签。

使用方法

目的基因克隆:用相应的限制性内切酶对 pET-His 载体和含有目的基因的 DNA 片段进行酶切,然后通过 DNA 连接酶将目的基因连接到载体的多克隆位点上,构建成重组表达质粒。

转化与筛选:将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞中,如 DH5α 用于克隆菌株,BL21(DE3)用于表达宿主。在含有相应抗生素(如氨苄青霉素)的培养基上进行筛选,挑取单克隆菌落。

诱导表达:挑取单克隆菌落接种到液体培养基中培养,当细菌生长到一定密度时,加入 IPTG 或乳糖及其类似物进行诱导,使 T7 启动子启动目的基因的表达。

蛋白纯化:收集诱导表达后的细菌,破碎细胞,释放出蛋白。利用 His 标签与镍 - 螯合柱的特异性结合,对目的蛋白进行纯化,再根据需要选择是否使用蛋白酶切除 His 标签。

注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!

热门标签:pET-His载体,pET-His质粒,pET-His

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