当前位置: 阿仪网 > 生物试剂/抗体/细胞 > 细胞生物学 > 其他 > 上海信裕生物科技有限公司 > 产品展示 > 细胞生物学 > 载体 > pET-His载体
pET-His载体
检测试剂盒
- 人检测试剂盒/Human
- 大鼠检测试剂盒/Rat
- 猪检测试剂盒/Porcine
- 小鼠检测试剂盒/Mouse
- 豚鼠检测试剂盒/Guinea pig
- 兔检测试剂盒/Rabbit
- 山羊检测试剂盒/Goat
- 牛检测试剂盒/Bovine
- 马检测试剂盒/Equine
- 鸡检测试剂盒/Chicken
- 猴检测试剂盒/Monkey
- 其它检测试剂盒/General
- 犬检测试剂盒/Dog
- 人Elisa试剂盒
- 小鼠Elisa试剂盒
- 大鼠Elisa试剂盒
- 其他Elisa试剂盒
- 兔Elisa试剂盒
- 猪Elisa试剂盒
- 鸡Elisa试剂盒
- 猴Elisa试剂盒
- 马Elisa试剂盒
- 牛Elisa试剂盒
- 生化试剂盒
抗体
蛋白/多肽/抗原
原代细胞
细胞系
分子生物学
细胞分析
- 细胞凋亡
- 细胞周期
- 细胞增殖
- 细胞活性
- 细胞毒性
- ROS检测
- 细胞代谢
- 细胞自噬
- 细胞成像
- 细胞粘附
- 细胞pH检测
- 细胞耗氧与酸化
- 细胞示踪与追踪
- 离子指示剂及膜电位
- 吞噬、内吞、受体内化
- 细胞抑制剂
生化试剂
细胞培养基
细胞
免疫学试剂
细胞生物学
一类医疗器械产品
实验耗材
蛋白质生物学
外泌体研究
微生物
企业档案
会员类型:旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累,可浏览访问
(41-90)良好信誉积累,可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累,可持续信赖
阿仪网旗舰版会员:11年
最后认证时间:
注册号: 【已认证】
法人代表: 【已认证】
参观次数:16003216
手机网站:http://wap.app17.com/c115321/
旗舰版网址:http://www.xybio-sh.com
详细内容
pET-His载体
产品规格:2ug
产品货号:XY91475VT
基本信息
| 质粒类型: | 大肠杆菌表达载体 |
|---|---|
| 启动子: | T7 |
| 载体标签: | ,N-HIS |
| 酶识别位点: | Thrombin |
| 载体抗性: | Ampicillin |
| 5' 测序引物及序列: | T7:5 TAA TAC GAC TCA CTA TAG GG 3 |
| 3' 测序引物及序列: | T7-t: 5 GCT AGT TAT TGC TCA GCG G 3 |
质粒图谱


结构特点
His 标签:在 N 端或 C 端含有 His 标签编码序列,通常是 6 个组氨酸(6×His)串联组成,如 pET-N-His-TEV 是 N 端含有 His 标签,pET-N-His-C-His 则在 N 端和 C 端都有 His 标签。His 标签可以与镍离子等金属离子特异性结合,利用镍 - 螯合柱进行亲和层析,方便对表达的融合蛋白进行纯化,即使在变性条件下也能有效纯化。
酶切位点:具有多种限制性内切酶识别位点,如 NdeI、BamHI、XhoI 等,位于多克隆位点区域,便于目的基因的插入。一些载体还含有特定的蛋白酶切位点,如 pET-N-His-TEV 的 N 端 His 标签后含有 TEV 酶切位点,pET-N-His-Thrombin-C-His 的 N 端 His 标签后有 Thrombin 酶切位点,可在目的蛋白纯化后用于切除 His 标签。
使用方法
目的基因克隆:用相应的限制性内切酶对 pET-His 载体和含有目的基因的 DNA 片段进行酶切,然后通过 DNA 连接酶将目的基因连接到载体的多克隆位点上,构建成重组表达质粒。
转化与筛选:将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞中,如 DH5α 用于克隆菌株,BL21(DE3)用于表达宿主。在含有相应抗生素(如氨苄青霉素)的培养基上进行筛选,挑取单克隆菌落。
诱导表达:挑取单克隆菌落接种到液体培养基中培养,当细菌生长到一定密度时,加入 IPTG 或乳糖及其类似物进行诱导,使 T7 启动子启动目的基因的表达。
蛋白纯化:收集诱导表达后的细菌,破碎细胞,释放出蛋白。利用 His 标签与镍 - 螯合柱的特异性结合,对目的蛋白进行纯化,再根据需要选择是否使用蛋白酶切除 His 标签。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
热门标签:pET-His载体,pET-His质粒,pET-His















