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T4 DNA连接酶
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详细内容
T4 DNA连接酶
描述:T4 DNA Ligase 可催化相邻 DNA 链的 5’-P 末端和
3’-OH 末端以磷酸二酯键结合的反应,需 ATP 作辅酶,不仅
可以催化粘性末端之间或平滑末端之间的 DNA 的连接,也
可以催化 DNA 与 RNA 之间以及少数 RNA 之间的连接。可
应用于在粘性末端或平末端连接双链 DNA 分子,也可应用
于修补双链 DNA、RNA 或 DNA RNA 杂交体上的缺口。
组分
储存:-20°C 可保存 2 年。
活性定义:16°C 反应 30 分钟条件下,使 1pmol 的粘性末端DNA 连接所需要的酶量定义为 1Unit。
失活:65°C,10 分钟。
10×T4 Ligase Buffer:
500 mM Tris-HCl, pH 7.5, 50 mMMgCl2, 25mM DTT, 5mM ATP.

操作方法
1. 按以下组分配制反应体系

注意:两个片段的连接时,通常载体与插入片段的摩尔比为
1:3(但该比例并非绝对严谨,在 1:1-1:10 范围内均可获得
理想的实验结果),提取根据片段大小与浓度,计算其摩尔
浓度。
2. 如为粘末端连接反应, 22°C (16-37°C)连接 30min,
连接产物直接用于转化(或冻存于-20°C)。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
热门标签:T4,DNA连接酶,T4,DNA,连接酶
















