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详细内容
核糖核酸酶H
数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 600U
RNase H(核糖核酸酶H)是特异性分解RNA-DNA杂交体中的RNA链的核糖核酸内切酶,产生具有游离 3′-OH和 5′-磷酸末端的产物,该酶对单链的核酸,双链DNA或双链RNA不起作用。此产品主要用作: 通过Okayama-Berg法进行cDNA Cloning。 DNA-RNA杂交体的检定。在Oligo(dT)存在下除去mRNA 的Poly(A)末端。mRNA的定量。
1.感受态的制备
(1)核糖核酸酶H接种单菌落于2ml LB培养液中,37℃过夜。
(2)取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中,37℃振摇4~6h至A590=0.4~0.6。
(3)倒入50ml管内,水浴10min,以2500~3000rpm离心5min,弃上清。
(4)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体,冰浴20min,同上离心弃上清。
(5)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中,每管200μl,冰浴1~2h。
2.重组DNA的转化
(1)将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记:
(2)冰浴30min至1h。中间摇动3次,以防受体菌沉底。
(3)42℃90s。
(4)37℃水浴5min。
(5)核糖核酸酶H加入无相应抗生素的Lb 200μl,混匀后,37℃水浴30~60min。
(6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。
核糖核酸酶H载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体,核糖核酸酶H在细菌之间转移DNA 的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
ZI413-1兔抗羊IgG0.1mlZOMANBIO
ZI413-2兔抗羊IgG0.5mlZOMANBIO
ZI413-3兔抗羊IgG1mlZOMANBIO
ZI414-1兔抗HRP-HRP(PVP)0.1ml(1:1000)ZOMANBIO
ZI414-2兔抗HRP-HRP(PVP)0.5ml(1:1000)ZOMANBIO
ZI415-1BSA-HRP0.1ml(1:1000)ZOMANBIO
ZI415-2BSA-HRP0.5ml(1:1000)ZOMANBIO
ZI416-1人白蛋白-HRP0.1ml(1:1000)ZOMANBIO
ZI416-2人白蛋白-HRP0.5ml(1:1000)ZOMANBIO
ZI417-1兔抗生物素-HRP0.1mlZOMANBIO
ZI417-2兔抗生物素-HRP0.5mlZOMANBIO
ZI418-1兔抗亲和素-HRP0.1mlZOMANBIO
ZI418-2兔抗亲和素-HRP0.5mlZOMANBIO
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