胃蛋白酶
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详细内容
数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: 4℃保存
规格: 250mg
胃蛋白酶是一种消化性蛋白酶,由胃部中的胃粘膜主细胞(gastric chief cell)所分泌,功能是将食物中的蛋白质分解为小的肽片段。胃蛋白酶优先在苯丙氨酸、亮氨酸、酪氨酸和色氨酸的 C 端进行水解。本产品可单独或与其他蛋白酶联合在质谱分析和其他应用中进行蛋白分析,包括多肽图谱、蛋白鉴定、检测翻译后修饰等。
1.感受态的制备
(1)胃蛋白酶接种单菌落于2ml LB培养液中,37℃过夜。
(2)取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中,37℃振摇4~6h至A590=0.4~0.6。
(3)倒入50ml管内,水浴10min,以2500~3000rpm离心5min,弃上清。
(4)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体,冰浴20min,同上离心弃上清。
(5)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中,每管200μl,冰浴1~2h。
2.重组DNA的转化
(1)将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记:
(2)冰浴30min至1h。中间摇动3次,以防受体菌沉底。
(3)42℃90s。
(4)37℃水浴5min。
(5)胃蛋白酶加入无相应抗生素的Lb 200μl,混匀后,37℃水浴30~60min。
(6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。
胃蛋白酶载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体,胃蛋白酶在细菌之间转移DNA 的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
蛋白质研究(即用型试剂)
ZS301蛋白标准(5mg/ml BSA)1mlZOMANBIO
ZS302
ZS303PMSF(100mM)1mlZOMANBIO
ZS3045×Tris-甘氨酸电泳缓冲液250mlZOMANBIO
ZS305-1SDS-PAGE电泳液(10X)100mlZOMANBIO
ZS306SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)2mlZOMANBIO
ZS307非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X)2mlZOMANBIO
ZS308
ZS30910%过硫酸铵1.5mlZOMANBIO
ZS31030% 丙烯酰胺 (29:1)100mlZOMANBIO
ZS31140% 丙烯酰胺 (39:1)100mlZOMANBIO
ZS312-10.5M DTT2mlZOMANBIO
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