TEV蛋白酶
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:45:32
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详细内容
数量： 大量
保质期： 一年
保存条件： -20℃保存
规格： 300U
TEV蛋白酶（烟草蚀纹病毒蛋白酶；Tobacco Etch Virus protease）是来源于烟草蚀纹病毒(TEV)的Nla蛋白酶经改进后的50kDa的蛋白酶。其具有很强的位点特异性，能够识别EXXYXQ(G/S)的七氨基酸序列(Glu-Asn-Leu- Tyr-Phe- Gln-Gly)，切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸或丝氨酸之间。在PH 7.0，30℃时可达到最佳活性。切割后很容易利用其N端的HQ标签进行TEV蛋白酶清除。它具有如下特点：1. 在广泛的PH值和温度范围内都有活性，用最适条件切割每个融合蛋白，使之保持活力和正确的构象。2. 有HQ标签，切割后可用镍亲和树脂方便的清除TEV蛋白酶。3. 可直接在液相和亲和树脂的固相切除融合蛋白：TEV蛋白酶可在在多种实验模式下方便使用。
1．感受态的制备
（1）TEV蛋白酶接种单菌落于2ml LB培养液中，37℃过夜。
（2）取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中，37℃振摇4～6h至A590=0.4～0.6。
（3）倒入50ml管内，水浴10min，以2500～3000rpm离心5min，弃上清。
（4）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体，冰浴20min，同上离心弃上清。
（5）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中，每管200μl，冰浴1～2h。
2．重组DNA的转化
（1）将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记：
（2）冰浴30min至1h。中间摇动3次，以防受体菌沉底。
（3）42℃90s。
（4）37℃水浴5min。
（5）TEV蛋白酶加入无相应抗生素的Lb 200μl，混匀后，37℃水浴30～60min。
（6）分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布，室温下干燥，然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。
TEV蛋白酶载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体，TEV蛋白酶在细菌之间转移DNA 的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
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